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• Gabby Alvarez Oviedo

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HEMATOXILINA EOSINA

REALIZADO POR: Álvarez Oviedo, Gabriela

HEMATOXILINA

HISTORIA 

Fue Wilhelm Waldeyer, pupilo del histólogo Henle, quien introdujo 15 años después el uso de la hematoxilina en tinciones histológicas.

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Es un producto natural que al ser oxidado constituye una substancia de color morado oscuro denominada hemateína.

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Luego del proceso de oxidación, su capacidad de tinción es muy limitada. Por eso debe combinarse con iones metálicos (sales de hierro III o aluminio II), que actúan como mordientes.

TECNICA Sumergir los preparados histológicos en xilol para eliminar los excesos de parafina.  Luego pasan por una serie de alcoholes (100°. 95° y 70°).  Se lava en agua para eliminar exceso de alcohol  Se sumerge en hematoxilina por 10 minutos, luego se lava en agua para eliminar excesos y se pasa rápidamente por alcohol ácido. 

Se lava nuevamente  Se sumerge 30 segundos en eosina.  Se pasa por otra serie de alcoholes, en orden creciente (70°, 95° y 100°).  Finalmente se deja remojar 10 minutos en xilol, antes de realizar el montaje final. 

RESULTADOS Núcleo celular: Azul  Citoplasma: Rosa  Musculatura: Rojo , rosa o fucsia  Glóbulos rojos: Rojo, anaranjado  Fibrina: Rosa 

NORMAS DE SEGURIDAD Sustancia no peligrosa  Puede causar irritaciones leves  Usar guantes 

EOSINA La eosina ya era de uso común a final del siglo XIX, siendo el resultado de la acción del bromo sobre la fluoresceína.  La eosina (del griego Eos, "amanecer") es un colorante acidofilo, en forma de polvo rojo cristalino, de uso ampliamente extendido en el ámbito industrial, desde la industria textil hasta el estudio biológico e histológico. Como curiosidad, también se utiliza en la coloración de la gasolina. 

La eosina Y (C20H8Br4O5, tetrabromofluoresceína), comúnmente conocida como eosina amarilla.  Es la mas utilizada 

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La eosina B (C20H8Br2N2O9, dibromodinitrofluoresceí na), también conocida como eritrosina B

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EOSINA Y

• EOSINA B

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Homólogos de la eosina son la floxina B, la eritrosina B, el rosa de bengala, el mercurocromo (Merck) y el mercurocromo (Gurr).

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La coloración resultante de la tinción con eosina es rosada-anaranjada para citoplasmas, y rojo intenso en el caso de los eritrocitos. Es fuertemente fluorescente(poco utilizada). La eosina es un colorante muy usado en tinciones de vitalidad. Es un colorante aniónico y no penetra en el interior celular a no ser que la membrana sea permeable (células muertas).

EOSINA Y ALCOHOLICA 

A partir de polvo de eosina: ◦ Disolver 0,5 g de eosina Y en etanol 95% ◦ Añadir una gota de ácido acético glacial

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A partir de eosina Y acuosa comercial ◦ Mezclar 100 cc de eosina Y acuosa 3% con 125cc de etanol 100% ◦ Añadir a la mezcla anterior 375 cc de agua destilada. ◦ De modo opcional, añadir unas gotas de ácido acético glacial

EOSINA Y ACUOSA 2% Disolver 25 g de eosina Y hidrosoluble en 1250 cc de agua destilada  Añadir unas gotas de ácido acético glacial 

MEDIDAS DE SEGURIDAD Sustancia no peligrosa  Puede causar irritaciones leves  Protección personal  Usar guantes 

GRACIAS