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Prueba de la Desoxirribonucleasa DNAsa La actividad desoxirribonucleasa (DNAsa) se ha demostrado fundamentalmente en los géneros Staphylococcus y Serratia y consiste en la propiedad de degradar el ADN a fracciones de menor peso molecular. Esta característica se ha utilizado para identificar las especies de Serratia marcescens y Staphylococcus aureus. Weckman y Catlin demostraron la estrecha correlación entre la producción de DNAsa de los cultivos de Staphylococcus aureus con la producción de coagulasa. Fundamento: Se basa en la presencia de la enzima termoestable DNAsa que es capaz de romper los enlaces fosfodiester internos de la molécula de DNA. Se utiliza un medio sólido que contiene verde de metilo o TSA los cuales se combinan con DNA altamente polimerizado. Cuando la combinación no ocurre, por acción de la enzima DNAsa, se produce una decoloración del medio. Resultado:

S. aureus

Producción de hidrólisis por la enzima DNasa

Hay hidrólisis del ácido nucleico

Interpretación: La placa de agar DNasa, posteriormente incubado a 37 °C por un período de 48 horas, se observó el crecimiento del microorganismo y al ser inundando la placa con HCl 0,1 N se evidencia la formación de un halo transparente alrededor del crecimiento de colonias bacterianas lo cual nos indica que el microorganismo tiene la enzima termoestable DNAsa. La cual es característica de S. aureus.

Discusión.  La prueba de DNAsa con el Estafilococos aureus presentan formación de una zona traslucida alrededor del crecimiento de colonias bacterianas. Indicándonos que tienen la propiedad de degradar el ADN a fracciones de menor peso molecular. Esto se debe a la presencia de la enzima termoestable DNAsa.  La placa se inunda con ácido clorhídrico, que causa la precipitación del ADN polimerizado y hace al medio opaco.

Conclusión.  La prueba de DNasa, se utiliza para diferenciar los microorganismos basados en la actividad de desoxirribonucleasa (DNasa).  El microorganismo aislado en el agar DNasa, tiene la enzima termoestable DNAsa.

Referencias bibliográficas: 1. Matthew h. Fusillo and Daniel l. Weiss. Qualitative estimation of staphylococcal Deoxyribonuclease. Laboratory Section for Infectious Diseases, D. C. General Hospital, and Department of Pathology, The George Washington University School of Medicine, Washington, D. C; J Bacteriol. 1959 October; 78(4): 520–522. [DISPONIBLE EN ] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC290579/?page=1 2. BD. DNase Test Agar. Instrucciones de uso, medios en placa listos para usar. Rev.: Junio de 2003. [DISPONIBLE EN] http://www.gpjasociados.com/edukatics/file.php/54/DNAsa.pdf