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• Juan Yujra Cárdenas

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Coriandrum sativum: evaluación de su efecto ansiolítico en el laberinto elevado en forma de cruz Emamghoreishi Masoumeh, Khasaki Mohammad, Aazam Maryam Fath. Departamento de Farmacología, Facultad de Medicina de la Universidad de Ciencias Médicas de Shiraz, Shiraz, Irán. Recibido el 11 de julio de 2003; recibido en su forma revisada 10 de junio 2004; aceptado 28 de junio 2004. Disponible en línea desde el 19 de noviembre 2004

RESUMEN Las aplicaciones clínicas de las benzodiacepinas como ansiolíticos están limitadas por sus efectos secundarios no deseados. Por lo tanto, el desarrollo de nuevos fármacos está bien justificado. Entre las plantas medicinales, Coriandrum sativum L. ha sido recomendada para el alivio de la ansiedad y del insomnio en la medicina popular iraní. Sin embargo, hasta ahora ningún estudio farmacológico ha evaluado sus efectos sobre el sistema nervioso central. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue examinar si el extracto acuoso de las semillas de Coriandrum sativum tiene efecto ansiolítico en los ratones. Además, también se evaluaron sus efectos sobre la actividad espontánea y la coordinación neuromuscular. El efecto ansiolítico del extracto acuoso (a 10, 25, 50, 100 mg/kg, por vía i.p. [intraperitoneal]) se examinó en ratones albinos machos en el laberinto elevado en forma de cruz tomado como un modelo animal de ansiedad. Los efectos del extracto sobre la actividad espontánea y la coordinación neuromuscular se evaluaron utilizando el medidor de actividad Animex y la vara rotatoria, respectivamente. En el laberinto elevado en forma de cruz, el extracto acuoso a 100 mg/kg mostró un efecto ansiolítico, aumentando el tiempo pasado en los brazos abiertos y el porcentaje de entradas en dichos brazos abiertos, en comparación con el grupo de control. El extracto acuoso a 50, 100 y 500 mg/kg, redujo significativamente la actividad espontánea y la coordinación neuromuscular, en comparación con el grupo de control. Estos resultados sugieren que el extracto acuoso de las semillas de Coriandrum sativum tiene efecto ansiolítico, además que puede poseer potenciales efectos sedativos y como relajante muscular. 1. INTRODUCCIÓN Los trastornos de la ansiedad en las sociedades modernas tienen una prevalencia relativamente alta y el representan importantes recursos financieros. Actualmente, los medicamentos más prescritos para los trastornos de ansiedad son las benzodiacepinas. Sin embargo, los usos clínicos de las benzodiacepinas están limitados por sus efectos secundarios, tales como deterioro psicomotor, la potenciación de otros fármacos depresores del sistema nervioso central y el riesgo de crear dependencia. Por lo tanto, el desarrollo de nuevos medicamentos que posean efectos ansiolíticos sin las complicaciones de las benzodiacepinas sería de gran importancia en el tratamiento de los trastornos relacionados con la ansiedad. Las plantas medicinales son una buena fuente para encontrar nuevos remedios para estos trastornos. En la medicina tradicional iraní, Coriandrum sativum L. (Umbelliferae) ha sido indicada para una serie de problemas médicos tales como los malestares de la dispepsia, pérdida del apetito,

convulsiones, insomnio y ansiedad (Zargari, 1991; Mir Heidar, 1992). Para propósitos médicos, la semilla del cilantro es utilizada empíricamente en diferentes formas de dosificación, incluyendo las semillas en polvo o como extracto seco (5.2 g/día), té (8.4 g/100 ml, hasta 30 g), tinturas (1:8 g/ml) (10-20 gotas), decocción o infusión (Zargari, 1991; Mir Heidar, 1992). Se han recomendado tanto el jugo de hojas frescas (30 g) como el té, o las semillas de cilantro en polvo para el alivio de la ansiedad y del insomnio (Mir Heidar, 1992), tomadas por lo general en una sola dosis antes de dormir. Usos similares de las semillas de cilantro (por ejemplo, para el alivio de nerviosismo e insomnio) también se han indicado en otras medicinas populares (Duke, 1983, 2002). Sin embargo, ningún estudio farmacológico o médico han evaluad los efectos de Coriandrum sativum L. (cilantro) sobre el sistema nervioso central. Por lo tanto, el presente estudio se llevó a cabo para ver si el extracto acuoso de las semillas de cilantro tiene un efecto ansiolítico en los ratones. Además, también se evaluaron los posibles efectos del extracto de cilantro sobre la actividad espontánea y la coordinación motora. 2. MATERIALES Y MÉTODOS 2.1. Animales Los ratones albinos macho, con pesos de 25-35 g, fueron adquiridos del bioterio de la Universidad de Ciencias Médicas de Shiraz. Los animales fueron albergados en jaulas en un número de 5 individuos, a 22±1°C, en un ciclo luz/oscuridad de 12 horas. Agua de grifo y alimento en pellet estaban disponibles ad libitum (a disposición). Se asignaron grupos de 6 a 11 ratones al azar, para los diferentes grupos de tratamiento y lo mismos fueron evaluados en un orden de contrapeso. Los animales no tenían noción de las condiciones del experimento. Todos los experimentos se llevaron a cabo en una habitación silenciosa con luz roja tenue entre las 9:00 a.m. y las 2:00 p.m. 2.2. Material vegetal Las semillas secas de cilantro fueron adquiridas de una fuente comercial en Shiraz, Irán. La identidad de las semillas fue confirmada por el Departamento de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia, en la Universidad de Ciencias Médicas de Teherán, en Teherán, Irán. Un ejemplar de muestra (C-100) se mantuvo en nuestro laboratorio para referencia futura. 2.3. Preparación del extracto acuoso Las semillas secas de cilantro se homogeneizaron hasta obtenerse un polvo fino. Se preparó una infusión de cien gramos de cilantro en polvo en 500 ml de agua destilada fría durante 24 horas, fue llevado a ebullición, luego se retiró de la fuente de calor y se dejó en infusión durante 15 minutos. El extracto fue filtrado, luego se concentró en baño de agua y fue llevado a sequedad bajo vacío. El rendimiento del extracto era del 7,9% (p/p). 2.4. Drogas El clorhidrato de diazepam (10 mg/2 ml; de Darou Pakhsh, Teherán, Irán) fue utilizado como un fármaco de referencia. Se diluye a 0,3 mg/10 ml y a 3 mg/10 ml con solución salina antes de su uso. Las diferentes concentraciones del extracto de cilantro fueron preparadas por diluciones seriadas a partir de una solución stock de 50 mg/ml del extracto preparado con solución salina.

Todas las soluciones se prepararon cada vez en los días de ensayo y fueron administradas por vía intraperitoneal (i.p.) en un volumen de 0.1ml/10 g de peso corporal de los ratones. 2.5. Elevated plus-maze model of anxiety Anxiolytic activity was measured using the elevated plusmaze test (Lister, 1987). The maze consisted of two open (30 cm × 5 cm × 0.2 cm) and two closed (30 cm × 5 cm × 15 cm) arms, extending from a central platform (5 cm × 5 cm) and elevated to a height of 45 cm above the floor. The entire maze was made of clear Plexiglas. Mice were individually placed on the center of the maze facing an open arm, and the number of entries and the time spent in closed and open arms were recorded during a 5-min observation period. Arm entries were defined as entry of all four paws into an arm. The percentage of open arm entries (100 × open/total entries) was calculated for each animal. The experimental animals were intraperitoneally treated with diazepam (0.3 mg/kg, n = 10) or the aqueous extract (10, 25, 50 or 100 mg/kg, n = 6–10), 30 min and 45 min, respectively, before evaluation in the maze. The coriander extract at doses higher than 100 mg/kg caused a marked decrease in motor activity that interfered with an accurate evaluation of anxiolytic effect. Therefore, higher doses of the extract were not included in the plus-maze test. 2.5. Modelo de ansiedad del laberinto elevado en forma de cruz La actividad ansiolítica se midió mediante la prueba del laberinto elevado en forma de cruz (Lister, 1987). El laberinto consistió en dos brazos abiertos (30 cm x 5 cm x 0,2 cm) y dos brazos cerrados (30 cm x 5 cm x 15 cm), que se extienden desde una plataforma central (5 cm x 5 cm) y está elevado a una altura de 45 cm por encima del suelo. Todo el laberinto estaba hecho de plexiglás transparente. Los ratones fueron colocados individualmente en el centro del laberinto, orientados hacia un brazo abierto, y el número de entradas y el tiempo pasado en los brazos abiertos y en los brazos cerrados se registraron durante un período de observación de 5 minutos. Las entradas en un brazo se definen como la entrada de las cuatro patas dentro del brazo. Para cada animal se ha calculado el porcentaje de las entradas en los brazos abiertos (100 × abierto/entradas totales). Los animales de experimentación fueron tratados con diazepam por vía intraperitoneal (0,3 mg/kg, n = 10) o con el extracto acuoso (a 10, 25, 50 o 100 mg/kg, n = 06.10), 30 minutos y 45 minutos, respectivamente, antes de evaluación en el laberinto. El extracto de cilantro a dosis superiores a 100 mg/kg provocó una marcada disminución de la actividad motora, lo cual interfirió con una evaluación precisa del efecto ansiolítico. Por lo tanto, no se incluyeron dosis mayores del extracto en la prueba del laberinto elevado en forma de cruz. 2.6. Actividad espontánea La actividad de ratones individuales ha sido registrada con el medidor de actividad Animex (modelo AB FARAD, Suecia). Los recuentos de la actividad se acumularon 20 minutos después de la administración de la solución salina (por vía i.p. [intraperitoneal], n = 11), del diazepam (3 mg/kg por vía i.p., n = 7) o del extracto de cilantro (10, 50, 100 o 500 mg/kg por vía i.p., n = 7) a intervalos de 5 minutos, durante 30 minutos. 2.7. Coordinación neuromuscular – vara rotatoria El efecto del extracto de cilantro sobre los movimientos coordinados del motor fue evaluado utilizando la prueba de la vara rotatoria. Un día antes de la prueba, los ratones fueron

entrenados para permanecer en la rueda giratoria (3 cm de diámetro, a 20 r.p.m.) durante más de 1 minuto. El día de la prueba, los ratones fueron probados en la vara rotatoria (modelo 7600, Ugo Basile, Italia) antes de la administración de la solución salina, el diazepam o el extracto acuoso de semillas de cilantro y 50 minutos después de dicha administración (es decir, inmediatamente después de la prueba de actividad). El número de segundos que cada ratón se mantuvo en la rueda giratoria fue grabado para un máximo de 300 segundos. 2.8. Estadísticas Los datos obtenidos a partir de la evaluación del extracto de cilantro en la prueba del laberinto elevado en forma de cruz, fueron analizados estadísticamente utilizando un ANOVA en un solo sentido. También se empleó una prueba t independiente para realizar la comparación de los promedios entre el grupo tratado con solución salina y el grupo tratado con diazepam en la prueba del laberinto elevado en forma de cruz. Las actividades espontáneas fueron evaluadas mediante un análisis de la varianza para medidas repetidas (factor entre-sujetos: tratamiento; factor intra-sujeto: tiempo después de la dosis). Los datos obtenidos a partir de la prueba de la vara rotatoria fueron evaluados utilizando el análisis univariado de varianza, teniendo como covariable al tiempo dedicado a la vara rotatoria antes de la inyección. Las comparaciones post hoc entre los distintos grupos se realizaron mediante la prueba t de Dunnett. Los análisis estadísticos se realizaron con el programa SPSS 10.0. P