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• Rodrigo Arce

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Laboratorio #5 “Preparación y coloración de elementos formes de la sangre”

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Introducción

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Marco teórico  ANTECEDENTES  DEFINICIONES Objetivos Materiales y métodos  MATERIALES  METODOLOGÍA Resultados y Discusiones RECOMENDACIONES Conclusiones CUESTIONARIO Bibliografía

Introducción: El siguiente informe tiene como objetivo principal mostrar la preparación y coloración de elementos formes de la sangre como también dar a conocer el proceso para su realización. Es por esto que se explicará de manera detallada algunos conceptos generales sobre el tema para una mejor comprensión seguidamente detallaremos el paso a paso de cada uno de los métodos tratados en esta práctica.

Marco teórico:  ANTECEDENTES: EL DESCUBRIMIENTO DE LA CIRCULACIÓN SANGUÍNEA:

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PLATÓN (427-347 AC): Trata de la circulación en el Timeo y esencialmente considera que la aorta y la cava serian dos venas una para la parte izquierda del cuerpo y otra para la derecha. El pulmón sería como una esponja, mediante la cual, el aire que entra contribuye a enfriar el corazón.

FIGURA 1: ESQUEMA DE LA CIRCULACIÓN DE LA SANGRE SEGÚN PLATÓN.

ARISTÓTELES (384-322 a.C.): De sus obras se deduce que no diferenciaba arterias de venas. Consideraba que el corazón era el sitio donde se formaba la sangre a partir de los líquidos procedentes de los alimentos y que era en la sangre donde se encontraba el alma y por lo tanto el corazón sería la residencia del alma. Por su parte la sangre en los vasos tendría un movimiento de flujo y reflujo como las aguas del Euripo ya que los vasos acababan en elementos cada vez más finos hasta que impiden el paso de sangre. FIGURA 2: ESQUEMA DE LA CIRCULACIÓN DE LA SANGRE SEGÚN ARISTÓTELES.

GALENO, CLAUDIO (c 130-c 200): consideraba dos sistemas de vasos, el sistema venoso o sanguíneo asociado al corazón derecho y al hígado y lleno de sangre y el sistema

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aéreo, arterial o espirituoso asociado al pulmón y corazón izquierdo. Ambos son independientes anatómicamente y su contenido es distinto pero entran en comunicación. A pesar de ello y de que ya se conocía la función de las válvulas aurículo-ventriculares en ningún momento se plantea que la sangre realice un movimiento circular sino un fluir y refluir con consumo a nivel tisular y regeneración a partir de los alimentos.

FIGURA 3: ESQUEMA DE LA CIRCULACIÓN DE LA SANGRE SEGÚN GALENO.

Este seria, esquemáticamente, la función cardiovascular que durante más de 1400 años se explicó en las Facultades Europeas. Sin embargo fue sometido a algunas modificaciones por parte de algunos pensadores, que sin modificarlo esencialmente, introdujeron algunos cambios que, con el tiempo, llevaron al concepto de circulación sanguínea. Una de las aportaciones fue la de Serveto que supuso la introducción del concepto de circulación menor o circulación pulmonar frente a la circulación sistémica o circulación general que descubrió Harvey.

 DEFINICIONES: LA SANGRE 4

Es un tejido de consistencia líquida que pasa por el sistema circulatorio de nuestro organismo, es de gran importancia fisiológica en vertebrados. Está constituida por el plasma y los elementos figurados.

FIGURA 3: FORMACIÓN DE CÉLULAS SANGUÍNEAS.

FIGURA 4: LA SANGRE

EL PLASMA AGUA

SOLUT

Es la parte líquida (transparente) de la sangre. Está compuesto por: Ocupa el 91% del plasma y actúa como un solvente. Sirve de transporte para los componentes sólidos de la sangre. Ocupan el 9%. Son sustancias disueltas en el plasma (proteínas plasmáticas, compuestos orgánicos – carbohidratos y sales minerales).

PLASM

NOTA: El suero tiene casi la misma composición que el plasma. FIGURA 5: PLASMA EN EL MICROSCOPIO.

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Lo componen las tres series hemáticas: hematíes (glóbulos rojos), leucocitos (glóbulos blancos), y trombocitos (plaquetas).

ELEMENTOS FIGURADOS ERITROCIT OS

También llamados hematíes o glóbulos rojos. Son células sanguíneas que se encargan de transportar el O2, no presentan núcleo y tienen forma bicóncava. La Hb transporta gases respiratorios (O2 y CO2).

HEMOGLOBI ANHIDRASA CARBÓNICA

TROMBOCIT OS LEUCOCITO S GRANULOCIT OS

AGRANULOCI

La H2CO2 cataliza la remoción de CO2. Llamados también plaquetas y son las células más pequeñas de la sangre. Su función es formar y servir de tapón (coagulo) a los vasos sanguíneos dañados. Conocidas también como glóbulos blancos. Su función es defender el organismo de infecciones.

Estos son: Neutrófilos; fagocitan y son los más abundantes, Eosinófilos; fagocitan y son menos abundantes, Basófilos; sintetizan heparina (anticoagulante) e histamina (vasodilatador) Estos son: Monocitos; son macrófagos, Linfocitos; inmunidad. FIGURA 6: ERITROCITOS OBSERVADOS MEDIANTE EL MICROSCOPIO.

ERITROCIT OS

PLAQUET

FIGURA 7: PLAQUETAS OBSERVADOS MEDIANTE EL MICROSCOPIO

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MONOCIT

FIGURA 8: MONOCITO Y LINFOCITOS OBSERVADOS MEDIANTE EL MICROSCOPIO.

LINFOCI

Objetivos:  Observar los elementos formes de la sangre, cada uno con su morfologia característica.  Introducir el manejo de las diversas técnicas existentes que permiten su visualización.  Conocer valores normales de hematocrito y hemoglobina.  Realizar correctamente un frotis de sangre, utilzando la coloración Wright.

Materiales y métodos:  MATERIALES: 1. MATERIAL BIOLÓGICO:

Sangre obtenid a del alumno .

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2. MATERIAL DE LABORATORIO:

MICROSCOPIO COMPUESTO

AGUA DESTILADA

PORTA OBJETO

COLORANTE WRIGTH

ALCOHOL YODADO

LANCETA HEMATOLÓGICA

ALGODÓN

 METODOLOGÍA:  PREPARACION DE LAMINAS

PASO 2 Limpiar el PASO 1 portaobjeto de Los frotis se cualquier impureza realizan sobre el con alcohol portaobjetos (incluso si es nuevo).  OBTENCIÓN DE LA SANGRE

PASO 3 Coger la lamina por sus bordes

 PASO 1 • Limpiar con alcohol yodado el dedo anular del cual se extraera la sangre requerida para realizar las experiencias.

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PASO 2 • Se procede a pinchar el dedo anular del alumno con una lanzeta hematológica para la extracción de sangre .

PASO 3 • Extraer cuidadosamente la cantidad necesaria de sangre para para realizar el trabajo de práctica asignado.

 COLORACIÓN DEL FROTIS Realizar el frotis en posición inclinada y de una sola pasada.

Por ultimo se lleva la muestra al microscopio para su observación.

Secar o fijar la muestra con ayuda de un mechero o al aire libre.

Desechar el colorante y lavar con agua el exceso.

Se le añade el wright y se deja en reposo Resultados durante 1 y minuto.

Se le agrega agua destilada y se deja en reposo nuevamente Discusiones: durante 10 minutos.

FIGURA 9: COLORACIÓN DE FROTIS.

 Resultados:

En las muestras realizadas por los diferentes grupos de trabajo se pudo observar a los diferentes elementos formes de la sangre: Se pudo observar la forma y el color de cada elemento de la sangre PLAQUETAS: se observó que contienen un núcleo, tienen forma de discos muy pequeños a diferencia de los leucocitos y se agrupan. LINFOCITOS: se observó que son células regularmente grandes a comparación de los eritrocitos con forma circular o de riñón y también presenta núcleo. MONOCITOS: son los elementos sanguíneos más grandes de forma ovalada y con un núcleo de forma irregular. PLASMA: un fluido traslúcido y amarillento, es la matriz extracelular líquida en la que están suspendidos los elementos formes. ERITROCITOS: es anucleado, de forma esférica aplanada y bicóncava, se presentan en mayor proporción en la sangre.

 Discusiones: Al momento de observar los leucocitos no se pudo diferenciar a los eosinófilos, neutrófilos y basófilos ya que se parecen mucho.

Recomendaciones:  Tener sumo cuidado al momento de hacer el pinchazo con la lanceta, puesto que dicho instrumento debe estar esterilizado.  Limpiar correctamente el portaobjetos si es que es uno reutilizado ya que podría contener restos de grasa de muestras anteriores.  Al momento de obtener la muestra de sangre que se necesita se debe desechar la primera gota, ya que dicha gota sale mezclada con líquidos tisulares e impurezas.  El ambiente donde se realice esta práctica debe estar limpio.

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Conclusiones:  En la observación del frotis de sangre a través del microscopio pudimos apreciar glóbulos rojos (hematíes o eritrocitos), leucocitos (de diferente tipo), plaquetas e inclusive el plasma.  Los glóbulos rojos, al ser células sin núcleo, se diferenciaba una estructura sencilla y de color violáceo de un tamaño menor al de los glóbulos blancos.  Los hematíes no se reproducen, debido a que es imposible por la carencia de núcleo y que nacen del proceso denominado eritropoyesis.  Entre los leucocitos solo se pudieron diferenciar algunos como los monocitos linfocitos y neutrófilos aunque en escasa cantidad.

Cuestionario:

1. MENCIONE LOS COMPONENTES DEL PLASMA Y SUS RESPECTIVOS PORCENTAJES E INDIQUE LA FUNCIÓN QUE CUMPLE C/U DE ELLAS. a) AGUA (91%): actúa como un solvente y sirve de vehículo para el transporte de los componentes solidos de la sangre. b) SOLUTOS (9%): son sustancias disueltas en el plasma. Y se constituyen generalmente por:  PROTEÍNAS PLASMÁTICAS (7%): Albúmina, Globulina, Fibrinógeno y Protrombina.  COMPUESTOS ORGÁNICOS–CARBOHIDRATOS (1.1%): Glucosa, Lípidos, Vitaminas, Aminoácidos, Hormonas, Electrolitos, Oligoelementos y Enzimas.  SALES INORGÁNICAS (0.9%). 2. ESTABLEZCA LA DIFERENCIA ENTRE PLASMA Y SUERO El suero tiene casi la misma composición que el plasma. La única diferencia es que no presenta fibrinógeno, por esta razón el suero no se coagula ya que no cuenta con los factores de coagulación II, V y VIII. Además posee un alto contenido de serotonina, por la desintegración de plaquetas durante la coagulación sanguínea.

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3. EXPLIQUE QUÉ SUCEDE CUANDO HAY AUMENTO Y DISMINUCIÓN DE HEMATÍES Y DIGA QUE ES UNA ANEMIA. AUMENTO DE HEMATÍES (POLIGLOBULIA): es ocasionado por la necesidad de oxígeno en nuestro organismo y para compensarlo acelera la producción de hematíes. Pero esto puede ser consecuencia de muchos factores por ejemplo: en los fumadores severos, vivir o entrenar en altura enfermedades cardiacas o pulmonares previas o también puede ser la enfermedad en sí, en las que se produce un aumento en la producción de hematíes por la médula ósea. REDUCCIÓN DE HEMATÍES: esto puede ocurrir por muchos factores por ejemplo cuando los glóbulos rojos se destruyen prematuramente o el sistema inmunológico confunde a los glóbulos rojos con células invasoras y empieza a destruirlos entonces la medula ósea (el tejido blando y esponjoso del interior de los huesos que fabrica nuevas células sanguíneas) sencillamente no puede compensar la demanda de nuevas células por parte del organismo. ANEMIA: es uno de los trastornos sanguíneos más frecuentes, ocurre cuando la concentración de glóbulos rojos o hematíes es demasiado baja. Esto puede generar problemas de salud porque los glóbulos rojos contienen hemoglobina, que transporta oxígeno a los tejidos corporales, esto ocasionaría diversas complicaciones, incluyendo la fatiga y el agotamiento por el sobreesfuerzo de muchos órganos corporales. Entre muchas otras causas, la anemia puede ser el resultado de trastornos hereditarios, problemas nutricionales (como la deficiencia de hierro o de vitaminas), infecciones, algunos tipos de cáncer o la exposición a fármacos o toxinas. NOTA: La pérdida de sangre también puede provocar anemia (hemorragia excesiva, una intervención quirúrgica, incapacidad del organismo para coagular la sangre, entre otras). 4. HEMOGLOBINA. REPRESENTE SU ESTRUCTURA QUÍMICA Y DESCRIBA SU FUNCIÓN.

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FIGURA 10: Estructura Química de la Hemoglobina

La hemoglobina es una proteína globular, que se encuentra engrandes cantidades dentro de los eritrocitos y es de vital importancia fisiológica. Tiene como función principal transportar el O 2 (oxihemoglobina) desde los pulmones hacia los tejidos de todo el cuerpo y de manera inversa para el transporte de CO 2 (carbohemoglobina). También tiene otro tipo de funciones por ejemplo actúa como Buffer, ya que se enlaza a los protones por cada cuatro moléculas de oxígeno liberadas, por lo tanto contribuye al mantenimiento de un pH constante en la sangre. 5. DESCRIBA DE QUÉ MANERA LOS LEUCOCITOS REALIZAN LA FUNCIÓN DEFENSIVA DEL ORGANISMO. Los leucocitos utilizan dos mecanismos para realizar su función de defensa. El mecanismo de la fagocitosis y el mecanismo de la inmunidad, del que se conocen dos variantes: el humoral y el cerebral. LA FAGOCITOSIS: es el mecanismo a través del cual los neutrófilos, los eosinófilos y los monocitos (macrófagos) digieren diversos microorganismos, células mutantes y restos de células muertas. Se caracterizan por ser células migratorias, capaces incluso de abandonar, por acción quimiotáctica, la red vascular para llegar a los sitios de la infección. Los basófilos sintetizan heparina, el cual es un poderoso anticoagulante que garantiza el aspecto líquido de la sangre, e histamina, el cual es un poderoso vasodilatador de los vasos de la microcirculación de los tejidos lesionados, que participa en el proceso de

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inflamación. La vasodilatación garantiza un mayor flujo sanguíneo en la zona lesionada, salida de proteínas de la red vascular, llegada masiva de los neutrófilos al sitio de la posible infección, etc.

FIGURA 11: Etapas de la

fagocitosis

LA INMUNIDAD: está relacionado con la capacidad del sistema de defensa de reconocer y atacar todas las sustancias que considera extrañas al organismo, incluidos los antígenos que son los constituyentes químicos de muchos virus y células diversas. Los antígenos, provocan una reacción del sistema de defensa, en términos de producir anticuerpos (inmunidad humoral) o de sensibilizar leucocitos (inmunidad celular).

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6. DESCRIBA EN QUE CONSISTE C/U DE LOS TÉRMINOS: a) RETÍCULOCITOS: son células predecesoras de los eritrocitos con la diferencia de que poseen gránulos de ribosomas y algunas mitocondrias que les son útiles para sintetizar el 35 % de la hemoglobina restante. Se encuentran en niveles elevados en el plasma sanguíneo por causa de algunas anemias. b) HEMATOCRITO (HTO): Es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del número de glóbulos rojos y de su tamaño. c) HEMOLISIS: Es la descomposición de los glóbulos rojos. d) POLICITEMIA: Es una enfermedad de la médula ósea que lleva a un aumento anormal de la cantidad de células sanguíneas (principalmente glóbulos rojos). e) LEUCOCITOSIS: aumento del número de leucocitos en la sangre circulante, puede ser por causas fisiológicas, como en el embarazo o durante la digestión, o por causas patológicas, como en las infecciones. f) LEUCOPENIA: disminución del número de leucocitos en la sangre, por debajo de 4000 por milímetro cubico. g) HEMOFILIA: enfermedad hereditaria que se caracteriza por un defecto en la coagulación de la sangre debido a la falta de los factores VIII o IX, que intervienen en ella y que se manifiesta por una persistencia en las hemorragias. La mujer no la padecen pero si la pueden transmitir. 7. EXPLIQUE LA FÓRMULA LEUCOCITARIA. La fórmula de leucocitos o leucocitaria mide el porcentaje presente de cada tipo de leucocitos en el total de glóbulos blancos. Al ser un porcentaje si aumenta un grupo de leucocitos disminuye otro, aunque en ocasiones solo existe un aumento o disminución de un tipo concreto y por ello solo el porcentaje ofrece una valoración orientativa pero se debe contar el número total de cada grupo para saber cuál es la variable a tomar en cuenta y estudiar.

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La modificación del porcentaje de leucocitos puede orientar al diagnóstico de enfermedades infecciosas, inflamatorias, y otros procesos. 8. MENCIONE LAS SUSTANCIAS QUÍMICAS QUE SE ENCUENTRAN EN LA SANGRE. INDICANDO LA FUNCIÓN QUE CUMPLE EN EL ORGANISMO. La sangre está constituida por una parte líquida (el plasma), y unas células denominadas elementos figurados. A su vez, el plasma está constituido en un 90% de agua y en un 10% de sustancias diversas tales como glucosa, ácidos grasos, vitaminas, hormonas, gases disueltos, fermentos, proteínas (albúmina, fibrinógeno, globulinas), creatina, urea, ácido úrico, sustancias minerales tales como sodio (Na+), potasio (K+), Cloro (Cl-), iones bicarbonato (HCO3), hierro, cobalto y otros microelementos. Bibliografía:

 http://www.consejos.tubotica.net/seccionconsejos_det.php?IdConsejo=675  http://kidshealth.org/PageManager.jsp? dn=KidsHealth&lic=1&ps=107&cat_id=20261&article_set=59333  http://es.scribd.com/doc/112089704/Estructura-y-Funcion-de-laHemoglobina#scribd  http://blog.tuotromedico.com/otros/poliglobulia-o-aumento-de-los-globulosrojos-en-la-sangre/  http://www.bioquimicayfisiologia.com/2014/05/funcion-de-los-leucocitosglobulos-blancos.html  https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003646.htm  http://fisiologoi.com/paginas/historia/DEPLATONAGALENO.htm#1 ASIMOV.

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