Tesis-Dr-Bonilla-CORONEL - ZUÑIGA (1) (1).docx

UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICA “EFECTO ANTIINFLAMATORIO DE UN G

Views 52 Downloads 36 File size 5MB

Report DMCA / Copyright

DOWNLOAD FILE

Recommend stories

Citation preview

UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICA

“EFECTO ANTIINFLAMATORIO DE UN GEL A BASE DEL EXTRACTO ETANOLICO DE LAS HOJAS DE Senna multiglandulosa (MILLHUA TANQUISH) EN RATAS”

Tesis para optar el Título Profesional de Químico Farmacéutico y Bioquímico TESISTAS BR: José Adolfo Coronel Silva BR: Gabriela Zuñiga Trucios.

ASESOR: Dr. Pablo Enrique Bonilla Rivera 25 de julio del 2017 Lima – Perú 2017

DEDICATORIAS

A Dios por darme la vida, por mantenerme en este camino, por darme las fuerzas en todo momento y de esta manera cumplir con éxito mis objetivos planteados en esta etapa de mi vida. A mi novia Breny, por su apoyo incondicional y por estar siempre presente en este recorrido académico y arduo trabajo para alcanzar mi meta. A mis padres Consuelo y Felix, también a mis hemanos(as), por depositar su confianza en mí, por sus sabios consejos, por sus ejemplos de responsabilidad y valores.

José Adolfo El presente trabajo es dedicado a DIOS por mantenerme bien de salud y darme las fuerzas necesarias para continuar con mi mayor objetivo. A Mi novio Kevin por ser mi fuente de inspiración por estar conmigo en todo momento brindándome apoyo, fuerza y por sus sabios consejos. A mis hermanos, por ser el primer cimiento para mi vida profesional Pedro, Cesar, Yesica, Nataly, Jhonny.

Gabriela

AGRADECIMIENTOS A la Universidad Inca Garcilaso de la Vega, por darme la oportunidad para desarrollar mis capacidades, adquirir nuevos conocimientos, formarme profesionalmente y también como persona; así mismo a todos los docentes de la Facultad de Farmacia y Bioquímica que durante mi vida estudiantil supieron entregarme sus sabios conocimientos y consejos. A nuestro asesor de Tesis Dr. Pablo Enrique Bonilla Rivera, por su valioso apoyo, orientación y generosidad; por compartir su experiencia para desarrollar y culminar el presente trabajo.

Al Prof. Gilmer Soliz Sánchez, Dr. Q.F. Orlando Oscar Acosta Cornejo, Q.F. Carlos Cano Pérez, Dra. Lidia Edith Goicochea Samanez; por su gran apoyo invalorables consejos y orientación que permitieron la realización del presente trabajo.

A todos nuestros amigos por su amistad, y por acompañarnos durante toda la carrera profesional, mil gracias.

Gabriela y José Adolfo

RESUMEN Senna multiglandulosa “Millhua tanquish” es una planta nativa, utilizada en medicina tradicional por sus beneficios en la salud. En el presente trabajo de investigación se evaluó la actividad antiinflamatoria del gel a base del extracto “Millhua tanquish”

etanólico de las hojas de Senna multiglandulosa procedente de Huancayo distrito de Viquez.

Se determinó los metabolitos

secundarios mediante la marcha fotoquímica; se obtuvo: flavonoides, taninos, alcaloides glicosidos, quinona. Luego se efectuó el screening cromatografico, para posteriormente realizar las lecturas al espectrofotómetro se determinó los siguientes compuestos químicos: 6-hidroxi-4',5'7-trimetoxiflavona, 5-hidroxi3',4',7-trimetoxiflavonol, 4',5-dihidroxi-3',5',7-trimetoxiflavonol, 3',7-dihidroxi-4',6dimetoxiaurona. Para la investigación farmacológica tópica, se preparó un gel base, al cual se le añadió concentraciones del extracto al 1, 3 y 5 por ciento, como referencia se utilizó Diclofenaco (gel) al 1 por ciento. En el experimento se usó ratas machos de 300 g ± 50 g. La técnica para inducir a la inflamación fue edema plantar inducido con carragenina al 1 por ciento. En las condiciones experimentales realizadas se demostró que el gel a base del extracto etanólico de hojas de Senna multiglandulosa

“Millhua tanquish” posee efecto

antiinflamatorio, además se evidenció que el extracto puro y la concentración al 5 por ciento, presentó un mejor comportamiento antiinflamatorio a lo largo de todos los momentos de tiempo comparado con el control (+).

Palabras

Clave:

antiinflamatoria.

Senna

multiglandulosa

“Millhua

tanquish”;

Actividad

ABSTRACT Senna multiglandulosa "Millhua tanquish" is a native plant, used in traditional medicine for its health benefits. In this research, the antiinflammatory activity of the gel based on the ethanolic extract of Senna multiglandulosa leaves "Millhua tanquish" from Huancayo district of Viquez was evaluated. Secondary metabolites were determined by phytochemical gait; was obtained: flavonoids, tannins, alkaloids glycosides, quinone. The following chemical compounds were determined:

6-hydroxy-4',5',7-trimethoxyflavone,

trimethoxyflavolol, 4',5'-dihydroxy-3',5',7-trimethoxyflavolol,

5-hydroxy-3',4',73',7-dihydroxy-4',

6-dimethoxyuronone. For the topical pharmacological investigation, a base gel was prepared; to which concentrations of 1, 3 and 5 percent extract were added as reference, 1 percent Diclofenac (gel) was used as reference. In the experiment, male rats of 300 g ± 50 g were used. The technique to induce inflammation was plantar edema induced with 1 percent carrageenan. In the experimental conditions, it was demonstrated that the gel based on the ethanolic extract of Senna multiglandulosa leaves "Millhua tanquish" has antiinflammatory effect, in addition it was evidenced that the pure extract and the concentration at 5 percent, showed a better anti-inflammatory behavior throughout Of all time points compared to the control (+). KEY WORDS: Senna multiglandulosa "Millwa tanquish"; Anti-inflammatory activity.

ÍNDICE Dedicatoria Agradecimiento Índice de Tablas Índice de Figuras Índice de Anexos Resumen Abstract Pag Introducción

1

CAPÍTULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

2

1.1. Descripción de la realidad problemática

2

1.2. Formulación del problema

3

1.2.1. Problema general

3

1.2.2. Problemas específicos

3

1.3. Objetivos de la investigación

4

1.3.1. Objetivo general

4

1.3.2. Objetivos específicos

4

1.4. Justificación de la investigación

4

1.5. Limitaciones de la investigación

6

CAPÍTULO II: MARCO TEÓRICO

7

2.1. Estado del arte nacionales y extranjeros

7

2.2. Antecedentes de la investigación

10

2.2.1. Antecedentes nacionales

10

2.2.2. Antecedentes extranjeros

13

2.3. Bases legales

15

2.3.1. Normas nacionales

15

2.3.2. Normas extranjeras

15

2.4. Bases teóricas

15

2.4.1. Descripción general de la planta

15

2.4.2. Distribución botánica

16

2.4.3. Identificación taxonómica

16

2.4.4. Descripción física de la planta

16

2.4.5. Propiedades curativas

17

2.4.6. Metabolitos secundarios

17

2.4.7. Tipos de metabolitos secundarios básicos

17

2.4.8. Registro de campo (ubicación geográfica)

19

2.4.9. Cromatografía de capa fina

23

2.4.10. Prueba de Edema Plantar en ratas inducido por

24

Carragenina 2.4.11. Reformulación de formas farmacéuticas de aplicación tópica con

26

efecto antiinflamatorio

2.4.12. Farmacología Dermatológica

28

2.4.13. Lineamientos generales para el tratamiento por vía

28

tópica 2.4.14. Drogas tópicas Cutáneas

29

2.4.15. Inflamación

30

2.4.16. Antiinflamatorios

35

2.4.17. Ratas (rattus norvegicus)

37

2.4.18. Instrumento de medición (vernier digital)

37

2.5. Formulación de hipótesis

38

2.5.1. Hipótesis general

38

2.5.2. Hipótesis específica

38

2.6. Operacionalización de variables e indicadores

38

2.6.1. Variables

38

2.6.2 Dimensiones

39

2.6.3 Indicadores

39

2.7. Definición de términos básicos

CAPÍTULO III: METODOLOGÍA

40

42

3.1. Tipo y diseño de la investigación

42

3.2. Población y muestra

42

3.2.1. Población

42

3.2.2. Muestra

42

3.2.3. Técnicas e instrumentos de recolección de datos

43

3.2.4. Descripción de instrumentos

43

3.2.5. Validación de instrumentos

43

3.2.6. Técnicas de procesamiento de datos y análisis estadístico

44

3.3 Equipos, materiales y reactivos

45

3.3.1 Material biológico

45

3.3.2. Material de vidrio y otros

45

3.3.3. Equipo e instrumentos

45

3.3.4. Reactivos

45

3.4 Procedimientos experimentales

46

3.4.1. Recolección

46

3.4.2. Obtención del extracto etanólico

46

3.4.3. Marcha de solubilidad

46

3.4.4. Tamizaje fitoquímico

47

3.4.5. Screening cromatográfico

49

3.4.6. Elaboración del gel

53

3.4.7 Evaluación de actividad antiinflamatoria (método del

55

edema plantar).

CAPÍTULO IV: RESULTADOS y DISCUSIONES

58

4.1. Procesamiento de datos: Resultados

58

4.1.1. Identificación de metabolitos secundarios

58

4.1.2. Lectura al espectrofotómetro

60

4.1.3. Prueba de hipótesis efecto antiinflamatorio

63

4.2. Discusión de los resultados

85

4.2.1. Evaluación de la inflamación

85

4.2.2. Identificación de metabolitos secundarios

87

CAPÍTULO V: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

90

5.1. Conclusiones

90

5.2. Recomendaciones

91

Referencias bibliográficas

Anexos Anexo 01: Matriz de consistencia Anexo 02: Matriz de operacionalización de variables Anexo 03: Formulación del problema de investigación Anexo 04: Análisis del problema de investigación Anexo 05: Instrumento de recolección de datos. Anexo 06: Juicio de expertos.

92

Anexo 07: Matriz de Validación por Juicio de Expertos. Anexo 08: Materia prima Anexo 09. Obtención del extracto Anexo 10: Tamizaje fotoquímico del extracto de hojas DE Senna multiglandulosa), Millhua tanquish Anexo 11: Separación de metabolitos secundarios Anexo 12: Elaboración del gel Anexo 13. Evaluación de la actividad antiinflamatoria del gel de extracto de hojas de Senna multiglandulosa), Millhua tanquish Anexo 14. Espectrofotometría UV/Vis Anexo 15. Clasificación taxonómica de “Millhua tanquish”

ÍNDICE DE TABLAS

Tabla 01.- Marcha de solubilidad del extracto seco de hojas de Senna

58

multiglandulosa “Millhua tanquish”. Tabla 02.- Screening Fitoquimico del extracto seco de hojas de Senna

59

multiglandulosa “Millhua tanquish”. Tabla 03.- Análisis de la distribución de la magnitud en mm. de inflamación para

65

cada tratamiento evaluado

Tabla 04.- Distribución de las medidas en mm de la magnitud

68

inflamación según tratamiento evaluado en ratas Tabla 05.- Análisis de la distribución de la magnitud en mm de

71

inflamación en cada momento de evaluación Tabla 06.- Distribución de las medidas de la magnitud en mm de

73

inflamación en los momentos de evaluación en ratas Tabla 07.- Evaluación del modelo de Análisis de Varianza (ANOVA) de

76

medidas repetidas de dos factores de la magnitud de la inflamación en ratas. Tabla 08.- Medias de la magnitud en mm de inflamación según

76

tratamiento evaluado y momento de evaluación Tabla 09.- Comparación post-hoc de las medias de la magnitud en mm

77

de inflamación entre momento de evaluación y según tratamiento evaluado en ratas. Tabla 10.- Comparación post-hoc de las medias de la magnitud en mm

78

de ancho inflamación entre tratamiento a evaluar y momento de evaluación en ratas Tabla 11.- Análisis de la Aceptación de la Hipótesis General como Respuesta Inductiva a los Resultados Estadísticos de sus Hipótesis Específicas.

84

ÍNDICE DE FIGURAS

Figura 01.- Estructura química del flavonoide; 6-hidroxi-4´,5´7trimetoxiflavona. Figura 02.- Estructura química del flavonoide; 5-hidroxi-3´,4´,7-

60

61

trimetoxiflavonol. Figura 03.- Estructura química del flavonoide; 4´,5-dihidroxi-3´,5´,7-

61

trimetoxiflavonol. Figura 04.- Estructura química del flavonoide; 3´,7-dihidroxi-4´,6-

62

dimetoxiaurona. Figura 05.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

66

ante la exposición a control (-). Figura 06.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

66

ante la exposición a control (+). Figura 07.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

66

ante la exposición a Extracto al 1%. Figura 08.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

67

ante la exposición a Extracto al 3%. Figura 09.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

67

ante la exposición a Extracto al 5%. Figura 10.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

67

ante la exposición a Extracto Puro. Figura 11.- Gráfico de caja y bigotes de la magnitud inflamación según

69

tratamiento evaluado en ratas. Figura 12.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

71

a las 2 horas. Figura 13.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

71

a las 3 horas. Figura 14.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación a las 6 horas.

72

Figura 15.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

72

a las 18 horas. Figura 16.- Gráfico Q-Q de la distribución de la magnitud de inflamación

72

a las 21 horas. Figura 17.- Gráfico de caja y bigotes de la magnitud de inflamación en

73

los momentos de evaluación en ratas Figura 18.- Gráfico de dispersión de medias de la magnitud de inflamación entre tratamiento evaluado y según momento de evaluación en ratas

83

INTRODUCCIÓN En la actualidad se utiliza las plantas como medicina para curar distintas enfermedades principalmente en la zona rural, resaltando de esta manera como el principal recurso terapéutico de la humanidad, en su búsqueda de mejorar la terapia se han realizado valiosas investigaciones como resultado se ha obtenido fármacos de fuentes naturales.

El creciente auge de la fitoterapia ha permitido el empleo de extractos de plantas medicinales en el tratamiento de diferentes patologías de la piel, unas veces como excipientes emolientes o demulcentes incluidos en formulaciones farmacéuticas, y otras aportando directamente sustancias farmacológicamente activas. (1)

Por ello es importante la contribución en el incremento del

conocimiento sobre formulaciones que incorporen activos-sustancias, extractos provenientes de plantas medicinales (2).

Es muy importante realizar este tipo

de trabajos, en torno al aprovechamiento de los metabolitos secundarios de las plantas, y así darle un carácter más científico a nuestra medicina tradicional. Además, hay muchas plantas que requieren nuestra atención que no han sido estudiadas por completo, se ignoran por completo su actividad terapéutica principal (3). La finalidad de esta investigación se basa en la necesidad actual de dar soluciones a los procesos de inflamación que son muy comunes en nuestro medio, de tal forma reducir los efectos adversos que producen los medicamentos. En esta investigación se experimentó en vivo el efecto antiinflamatoria del gel a base del extracto de hojas de Senna multiglandulosa “Millhua tanquish”, mediante el test de edema inducido con carragenina al 1 por ciento, en modelos biológicos (ratas), con el objetivo de buscar una eficiencia antiinflamatoria del fitofármaco a diferentes concentraciones, e identificación los metabolitos secundarios con mayor presencia en el extracto.

pág. 1

CAPITULO I

1.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 1.1 Descripción del problema. El Perú posee una diversidad de plantas medicinales por el cual es importante evaluar sus efectos terapéuticos, en la costa, sierra y selva existen vegetales que contienen sustancias de valor medicinal aún por descubrir, variedades de plantas por analizar con posibles efectos farmacológicos que son de gran importancia para nuestra sociedad.

Un tejido lesionado ya sea por acción de bacterias, traumatismo u otros factores, provocan la inflamación que a largo plazo puede ser dañina, es necesario de manera inmediata tratarlo, los medicamentos comúnmente más utilizados para aliviar y tratar las inflamaciones externas son de aplicación tópica los cuales son más rápidos y efectivos.

Los antiinflamatorios son medicamentos más utilizados a nivel mundial, también son causantes de lesiones gástricas debido al uso prolongado vía oral, además los medicamentos sintéticos tienen efectos

adversos

que

pueden

causar

problemas

graves

al

consumidor, es un problema que nos induce a buscar alternativas y obtener un producto natural para tratar dichas patologías. “Senna multiglandulosa” Millhua tanquish, es utilizado de forma tradicional, en esta búsqueda por resaltar sus beneficios encontramos que existen factores que condicionan su uso, como la falta de pág. 2

accesibilidad de medicamentos en muchas poblaciones vulnerables por el incremento de los precios, es allí donde este estudio nos lleva a tener una alternativa frente a un mercado farmacéutico con altos precios y que solo se centra en la ciudad. La inflamación es un problema de salud común y universal.

1.2 Formulación del problema

1.2.1 Problema general.

¿El gel a base del extracto etanólico de las hojas de Senna Multiglandulosa

“Millhua

tanquish”

poseerá

efecto

antinflamatorio en ratas?

1.2.2 Problemas específicos. 

¿Cuál es la actividad antiinflamatoria del gel a base de extracto etanólico de las hojas de Senna multiglandulosa “Millhua tanquish” comparado con Diclofenaco (gel) en ratas?



¿En qué concentración del gel a base de extracto etanólico de las hojas de Senna multiglandulosa “Millhua tanquish” poseerá efecto antiinflamatorio en ratas?



¿Qué

metabolitos

concentración

secundarios

presenta

en

mayor

el extracto etanólico de las hojas de Senna

multiglandulosa “Millhua tanquish”?

pág. 3

1.3 Objetivos de la investigación

1.3.1 Objetivo general.

Comprobar el efecto antinflamatorio del gel a base del extracto etanólico de las hojas de Senna multiglandulosa “Millhua tanquish” en ratas.

1.3.2. Objetivos específicos. 

Comparar la actividad antiinflamatoria del gel a base del extracto etanólico de las hojas de Senna multiglandulosa “Millhua tanquish” con Diclofenaco (gel), en ratas.



Precisar la concentración del gel a base del extracto etanólico de las hojas de Senna multiglandulosa

“Millhua

tanquish” con efecto antiinflamatorio en ratas. 

Identificar algunos metabolitos secundario con mayor presencia en el extracto etanólico de las hojas de Senna multiglandulosa “Millhua tanquish”.

1.4 Justificación de la investigación. En nuestro país siempre ha tenido muy arraigadas sus tradiciones, entre las cuales destaca el uso de las plantas medicinales con el fin de restaurar o conservar la salud. Por falto de estudios, la mayoría de estos conocimientos se trasmitieron de manera empírica, en muchos casos no hay una base científica que los respalde, ni al cual acceder, aun la mayoría de las personas que viven en lugares extremos acude al uso de (extractos naturales) los famosos yerberos. pág. 4

Con respecto a esto Baez Castillo afirma: “es muy importante realizar este tipo de trabajos, para que se vaya acabando con la superstición que siempre ha girado en torno a las plantas, y así darle un carácter más científico a nuestra medicina tradicional. Además, aún hay muchas plantas que requieren nuestra atención y que no han sido estudiadas, se ignora por completo su actividad terapéutica” (5). Estos estudios son necesarios y beneficiosos para nuestra sociedad, ayudando a resolver muchos mitos medicinales donde la eficacia de sus acciones fitoterapéuticas tienen una base científica, llenando el vacío dejado por generaciones. Según Santamaría C. “Los productos naturales constituyen un importante campo de la investigación farmacológica, presentando amplias posibilidades para llegar al conocimiento de nuevas e interesantes moléculas útiles en el tratamiento de determinadas patologías” (7). “Los fármacos antiinflamatorios de uso actual, inducen efectos secundarios en la mayoría de los pacientes, por ejemplo los AINE antiinflamatorios no esteroides (al ser administrados por vía oral) provocan irritación de la mucosa gástrica de diversa severidad, por lo que es indispensable contar con nuevas alternativas terapéuticas con efecto antiinflamatorio con menor toxicidad y costo” (22). Por estos problemas que existen hoy en día, es importante evaluar el efecto

de

Senna

multiglandulosa

“Millhua

tanquish”

como

antiinflamatorio, a través de la aplicación tópica de un gel a base del extracto etanólico de hojas de dicha especie y de esta manera saber que proporciona una terapia eficaz, segura, accesible, de fácil y rápida administración.

pág. 5

1.5 Limitación de la investigación. El estudio se efectuó bajo modelo biológico experimental en ratas albinas, por lo tanto se sometió al proceso planificado por el investigador, lo cual permitió comprender mejor el efecto de la terapia alternativa en el manejo de los cuadros inflamatorios externos. Concerniente con lo teórico, existen estudios similares que facilitó desarrollar los objetivos planteados, en cuanto a los recursos económicos estuvo al alcance del investigador. Para realizar las actividades experimentales se tuvo acceso al laboratorio de farmacognosia y química instrumental de la Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica de la Universidad Inca Garcilaso de la Vega y en el laboratorio de farmacología del bioterio de medicina de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

pág. 6

CAPITULO II 2. MARCO TEORICO

2.1 Estado del arte nacional y extranjero.

Metodología de la investigación

Autores

Sisalema

Sánchez,

(2013)

Diana Elizabeth Separación de metabolitos secundarios de

martin

multijuga)

galvis con

Dificultades identificadas en efecto antiinflamatorio de un gel a base del extracto etanólico de las hojas de Senna multiglandulossa “Millhua tanquish”.

(Senna actividad

Marcha fitoquímica

antibacteriana.

Vargas, C. (2007) Estudio de la actividad cicatrizante y antiinflamatoria del extracto alcohólico de las hojas de Senna reticulata (Willd.) H. Irwin &Barneby (Retama). Marlon Díaz. (2016) Evaluación de la actividad antiinflamatoria de una crema a partir del extracto purificado de Baccharis tricuneata (L.f.) Pers. “taya”. Asociación Científica de Investigación Farmacéutica.

El autor estudió una especie de Senna; con actividad antibacteriana. En las cuales abarco identificación de metabolitos secundarios. Uso como tratamiento su extracto Sin embargo dio resultado, pero no preparo un fitofármaco.

Marcha fitoquímica

En su investigación de hojas de Senna reticulata , en las cuales administró extracto de las hojas, como cicatrizante y antiinflamatorio

Marcha fitoquímica

En su trabajo de investigación elaboró una crema a partir de un extracto de Baccharis tricuneata. Pertenece a una distinta especie de vegetal. No es Senna.

Ramírez, E. et al. (2014); realizó

una

“Actividad

investigación antioxidante,

antiinflamatoria inmunomoduladora

Marcha fitoquímica

e del

extracto clorofórmico de las hojas de Chuquiraga lessing “Huamanpinta”.

El autor administró vía oral su extracto a las ratas, dando resultado el extracto

pág. 7

puro.

Frente a los métodos que adoptan los distintos autores para conseguir los resultados, cada modelo experimental se basa en un elemento distinto del proceso; cada modelo experimental es un reflejo de compromisos académicos diferentes. La existencia de una gran diversidad de especies vegetales, presentan distintos metabolitos secundarios. En el presente trabajo de investigación se evaluó la actividad antiinflamatoria del gel a base del extracto etanólico de las hojas de Senna multiglandulosa

“Millhua tanquish”

procedente de Huancayo

distrito de Viquez. Palabras Clave: Senna multiglandulosa “Millhua tanquish”; Actividad antiinflamatoria.

Es así tras haber realizado una revisión bibliográfica sobre los productos naturales activos en procesos inflamatorios, se planteó en este trabajo de investigación demostrar que la aplicación tópica a base de hojas de Senna multiglandulosa “Millhua Tanquish” en ratas albinos con edema plantar inducidos por carragenina al 1 por ciento, presenta efecto antiinflamatorio, analizando diferentes métodos con procedimientos farmacológicos que corroboren su propiedad antiinflamatoria. A su vez también conocer en qué vehículo como base podría conformar su formulación para la elaboración de la aplicación tópica y asimismo conseguir la dosis eficaz terapéutica, con el único propósito de validar el uso popular de esta especie nativa; que se presume que por poseer una variedad de flavonoides junto a otras sustancias activas, se le atribuye la excelente propiedad antiinflamatoria. La finalidad de esta investigación se basa en la necesidad actual de dar soluciones a los procesos de inflamación que son muy comunes en nuestro medio, de tal forma reducir los efectos adversos que producen los medicamentos, (AINES).

pág. 8

pág. 9

2.2. Antecedentes de la investigación.

Hoy en día se tiene acceso a una innumerable cantidad de información científica sobre plantas en todo el mundo, sobre el

desarrollo de

fitofármacos, que es usado en distintas patologías, así como su análisis fitoquímico, ha revelado la existencia de infinidad de sustancias que tienen efectos terapéuticos. Sin embargo aún existe un grupo que no ha sido estudiado, los cuales necesitan el respaldo científico para validar su uso terapéutico; es allí donde nace el interés por investigar el efecto antiinflamatorio de la especie Senna multiglandulosa “Millhua tanquish”. Las investigaciones son necesarias para evaluar efectos terapéuticos, determinar los tipos de constituyentes químicos de la planta, examinar nuevas estructuras que sirvan como base para nuevos fármacos, descubrir otros fitofármacos con el fin de salvaguardar nuestra salud.

2.2.1 Antecedentes nacionales Hoyos V, et al. (2011). En su tesis Doctoral “Diseño de una formulación de aplicación tópica a base de Baccharis latifolia (Chilca), con efecto antiinflamatorio.” En su investigación “la concentración de 2.5 mg/g fue seleccionada para elaborar la forma farmacéutica del extracto al 2 por ciento, obteniéndose un crema-gel, fue determinado por cromatografía de columna, utilizó el método del edema plantar en ratones emplearon la técnica de edema plantar inducido por carragenina. El efecto antiinflamatorio del extracto en crema gel fue superior a lo esperado” (2). Poma E, et al. (2011). En su investigación; “Estudio fitoquímico y actividad antiinflamatoria de la Annona muricata L. (guanábana) de Cuzco”. “Indujo a una inflamación por el método del edema plantar inducido por λ-carragenina; realizó un ensayo preliminar pág. 10

para determinar la dosis adecuada partiendo de la dosis tradicionalmente usada, en la localidad de Quillabamba; agrupó las ratas albinas en 3 grupos: Grupo control: Agar-agar; Grupo patrón: Indometacina 5 mg/Kg en agar-agar y Grupo droga: Extracto

acuoso

de

Annona

muricata

L.

La

dosis

que

administraron es de 1,5 mg/Kg de peso del extracto acuoso de hojas

secas

de

Annona

muricata

L.

presentó

efecto

antiinflamatorio, con eficacia del 53,18% en comparación con la Indometacina” (10).

Enciso, et al. (2011). En su tesis doctoral “Efecto antiinflamatorio y antioxidante de los flavonoides de las hojas de Jungia rugosa Less (matico de puna) en un modelo experimental en ratas”. Según la tesis doctoral de Enciso, Edwin, se refiere:

“Las hojas

de Jungia rugosa Less fueron recolectadas en el cerro Condorcunca, a 3 500 msnm, distrito de Quinua, departamento de Ayacucho. La actividad antiinflamatoria fue evaluada in vivo usando el método de edema plantar inducido por carragenina y en sangre se cuantifico los niveles séricos de interleuquinas 1, 6 y proteina C reactiva (PCR); también, se indujo el granuloma, según Sedwicks,

evaluándose

por

histopatología.

La

actividad

antioxidante fue evaluada in vitro mediante la neutralización del radical 1,1-difenil- 2-picril-hidrazilo (DPPH). Principales medidas de resultados: Actividad antiinflamatoria y antioxidante” (11).

Díaz, M. Et al; (2012); en su investigación, “Evaluación de la actividad antiinflamatoria de una crema a partir del Extracto purificado de Baccharis Tricuneata (L.f.) Pers. (Taya)”. “Usó como inductor aceite de Crotón al 5 por ciento administró 20 μL en la oreja derecha del ratón; respecto a las cremas y al fármaco de referencia se administraron 20mg Para ambas muestras de estudio. El control positivo se administró betametasona al 0.05 por ciento. Después de 4 horas de tratamiento, por dislocación pág. 11

cervical se sacrificaron a los ratones, compararon las medidas de las orejas, la crema tiene actividad antiinflamatoria desde la mínima concentración al 1 por ciento de 56.38% cuando mayor sea la concentración mejor es el efecto antiinflamatorio” (12). Castillo O, et al. (2013), en su investigación “Identificación de metabolitos secundarios presentes en la planta nativa (Cucharilla) Oreocallis grandiflora”. Menciona que “para el análisis fitoquímico, realizó la maceración estática, filtración, evaporación del solvente, separación de metabolitos secundarios con el uso de la cromatografía de capa fina y la identificación de componentes activos, donde el punto de análisis fueron las reacciones de coloración. Los metabolitos secundarios encontrados en la determinación cualitativa de la planta nativa “Cucharilla” Oreocallis grandiflora. Fueron alcaloides, compuestos fenólicos como catequinas, flavonoides, quinonas, triterpenos y esteroides como glicósidos cardiotónicos” (13). Ramírez, E. et al. (2014); en su investigación “Actividad antioxidante, antiinflamatoria e inmunomoduladora del extracto clorofórmico de las hojas de Chuquiraga lessing (huamanpinta)”. Fue evaluada “mediante el modelo biológico de edema suplantar inducido por carragenina, descrito por Winter. Se emplearon 42 ratas sometidas a ayuno 12 horas antes de iniciar el ensayo, con libre acceso de agua y distribuidas aleatoriamente en seis grupos de siete ratas cada uno. Se administraron ibuprofeno 120 mg/Kg y prednisona 1,2 mg/Kg, como estándares, y el extracto a 100, 200 y 300 mg/Kg de peso. En el porcentaje de inhibición de la inflamación, se calculó la media de los incrementos de volumen de cada lote a 0,5; 1; 2; 3; 5 y 7 horas. El extracto presentó la mayor actividad antiinflamatoria a la dosis de 300 mg/Kg (39,1%) y 200 mg/Kg de peso (32,7%)” (14).

pág. 12

Churampi, L. et al. (2015); En su investigación; “Evaluación de la actividad antiinflamatoria del extracto etanólico del fruto de Passiflora mollissima (kunth) l.h.bailey “tumbo serrano” y su uso como activo biológico en industria cosmética”. “Indució a la oreja del ratón con TPA (12-0-temadecanoil forbol-13 acetato) y como grupo control positivo utilizó indometacina de 500 μg por oreja. El extracto etanólico del fruto al 20% de Passiflora mollissima (Kunth)

L.H.BaileyTumbo

serrano),

presenta

actividad

antiinflamatoria al administrarse por vía tópica a la dosis de 500 y 1000 μg” (15).

2.2.2 Antecedentes extranjeros Bas E. (2007), en su investigación. “Mecanismo de acción antiinflamatoria de 5-O-desmetilnobiletina y derivados del catalpol en hipersensibilidad retardada”. “Indució a una inflamación aguda con carragenina

y

fosfolipasa A2 (PLA2) ya que este es un

agente flogístico que induce inflamación por liberación de prostaglandinas es clásicamente utilizada por su capacidad de inducir inflamación aguda, edema, daño a los vasos sanguíneos, liberación de quininas y por potencializar la endotoxicidad, generando una Inflamación aguda” (16). Baez G. (2007), En su trabajo de investigación “Determinación del efecto antiinflamatorio de los extractos hexánicos, etanólicos y clorofórmicos de las plantas medicinales: Bursera aloexylon (etc.)”. Menciona que “el efecto antiinflamatorio se midió en ratas Wistar con peso de 150g a 200g, usó como inductor carragenina en la almohadilla plantar trasera derecha (pata problema), provocando inflamación, y la pata trasera izquierda fue el control, usó el fármaco indometacina como referencia de antiinflamatorio. Primero administró por vía oral el extracto y una hora después inyectó carragenina, la inflamación se midió en un pletismómetro, pág. 13

realizó seis mediciones desde el tiempo 0 hasta el tiempo 5. Su resultado se evaluó estadísticamente por análisis de varianza y la prueba de Dunnett y Fisher. Un valor de p