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• Leila Liz Reyna Reyna

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RESULTADOS Determinación cualitativa de Misoprostol

Pruebas de coloración

Espectrofotometría UV

Por reactivo de Marquis:

Método de Shimadzu:

Se midió una porción de la muestra de misoprostol y se evaporó a sequedad en una cápsula de vidrio. Luego se añadió 3 gotas de reactivo de Marquis, observándose una reacción positiva color anaranjado con un halo violeta.

En un tubo de ensayo se añadió 1 ml de misoprostol (disuelto en etanol absoluto), luego se adicionó 3 ml de H2SO4 0.1 N para darle el medio ácido. Se hizo un barrido de la muestra en el espectrofotómetro UV, desde 220 a 300 nm (λ óptimo = 254 nm).

Resultado:

Resultado:

Esta variación de color podría indicar la presencia de más de un compuesto, ya que un gran número de estos reaccionan con el reactivo de Marquis para dar una escala de colores que abarca casi todo el espectro visible. No es específica, sin embargo, esta reacción es positiva para tóxicos alcalinos como el misoprostol.

En la gráfica de absorbancia vs. longitud de onda, se observa que hay presencia de más de un pico de absorción; sin embargo, el pico máximo se halla por los 300 nm y no en 254 nm. Esto podría indicar que la solución no se hallaba a un pH ácido, pues los picos pueden variar según el pH del medio, o que la muestra estaba contaminada con algún otro compuesto.

DISCUSIONES En la 2da parte de esta práctica de laboratorio se trabajó con el misoprostol. Este fármaco posee aplicaciones diferentes y su uso clandestino provoca la interrupción de embarazos no deseados. Por eso, es necesario aprender métodos que puedas determinarlo sobre todo en el ámbito legal1. En el laboratorio se aprendió 2 métodos de determinación. 1ero, el uso del Test de Marquiz. Este reactivo es un agente reductor que está formado principalmente por Formaldehido (40%) y por H2SO4 concentrado2 y forma toda una gama de colores que al final permitirá identificar una gran cantidad de compuestos. Para este caso, la muestra que se uso fue el misoprostol estándar ya que no se contaba con ninguna muestra biológica. Al aplicar el reactivo de Marquiz al estándar se formó un color anaranjado suave con un halo color violáceo siendo esta prueba una reacción positiva aunque cabe mencionar que por las tonalidades anaranjadas y violáceas se puede decir que ha habido poca concentración de misoprostol3 o pudo haber ocurrido, aunque menos probable, la interferencia con otras moléculas dentro de la misma muestra. Otro método de identificación de misoprostol es por Espectrofotometría UV. Se tomó 5ml de la muestra estándar y se llevó al espectrofotómetro donde se observaron varios picos de absorción a una longitud de onda en un rango entre 225 hasta 350 nm, donde el pico máximo se halló en 300 nm y no en 254 nm. Las longitudes de onda de las radiaciones con que una molécula se puede absorber y, sobre todo, la eficiencia con la que se absorben depende mucho de la estructura atómica de la molécula y también de las condiciones del medio, entre ellas, el pH4. Es por ello que podemos decir que si hubo variaciones en los picos de absorción es porque hubo ciertas variaciones en el pH de la muestra o posiblemente variaciones en las otras condiciones. Cabe mencionar también que el misoprostol es de naturaleza alcalina y se usó H2SO4 concentrado en el medio para poder neutralizar la basicidad del misoprostol4. Estos 2 métodos fueron los que se usaron en la práctica de laboratorio pero el método más usado en el ámbito legal es la Cromatografía en Capa Fina. Se han realizado varios estudios donde utilizan también la Cromatografía no solo para determinar misoprostol sino también otras sustancias como Levonorgestrel y otros medicamentos en muestras biológicas5.

Referencias Bibliograficas 1. López L. Desarrollo de un método cualitativo y cuantitativo utilizando UPLC MS para determinación de misoprostol acido en orina. Tesis para optar el grado de magister en Toxicología. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Lima. 2016 2. Comba C. Drogas de diseño y su identificación. Revista de Criminalística Skopein. Vol.

10.

Febrero

2016.

Citado

el

10

noviembre

2019.

Disponible

en

http://www.skopein.org/ojs/index.php/1/article/view/71/65

3. Gonzales D. Perez A. Manual de procedimientos analíticos y toxicológicos para laboratorios de baja complejidad. Programa Internacional de Química. Argentina 2007. Citado el 10 noviembre 2019. Disponible en http://www.msal.gob.ar/images/stories/ministerio/intoxicaciones/laboratorios/manualprocedimientos-analiticos.pdf

4. Bárcena A. Fernández E. Espectrofotometría. Espectros de absorción y cuantificación

colorimétrica de biomolecular. Facultad de Medicina. Campus universitario de Rabanales. Córdoba, España. 2008. Citado el 10 noviembre 2019. Disponible en https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRIA.pdf

5. Servicio Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses. Vademécum. Procedimientos,

análisis, técnico – científica especializada en Medicina legal. Determinación de Misoprostol, Levonorgestrel y otro producto farmacológico por cromatografía en capa fina. Gestión de Métodos y protocolos de servicio. Quito, Ecuador. 2018. Citado el 10 noviembre 2019. Disponible en https://www.cienciasforenses.gob.ec/wpcontent/uploads/2019/07/vademecum.pdf