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• Andrea Guanoluisa

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PRUEBAS BIOQUIMICAS: (sistemas API, Microscan, Vytec, zinmogramas y auxonogramas) Los perfiles bioquímicos ante diferentes sustratos son las pruebas rutinarias más utilizadas para la identificación de especies de levaduras. Son métodos automatizados. Son métodos rápidos que permiten la identificación de microorganismos a través de la realización de diferentes pruebas bioquímicas, contienen diferentes medios de cultivo deshidratado o diferentes sustratos de enzimas de acuerdo al tipo de prueba.

PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD Microdilución en caldo (NCLSI) El método de prueba de susceptibilidad in vitro para especies de mohos y levaduras utilizando diluciones seriadas en caldo o medio de alto contenido de fosfatos y lectura con lector para placas de ELISA. Este método permite observar sensibilidad y resistencia a diferentes concentraciones. Es altamente SENSIBLE. Tiras LE Son tiras de acetato de celulosa impregnadas con antimicóticos a concentraciones decrecientes. Permite observar halos de inhibición al colocar en las placas de agar sembradas. Es un método muy sencillo y fácil de realizar, sin embargo en algunas ocasiones los dos lados donde el desarrollo toca la cinta pueden no mostrar una lectura definida. Sensidiscos Es muy similar al método de las tiras LE, solo que se utilizan discos de acetato de celulosa impregnados. Es muy fácil de realizar, aunque puede presentar el inconveniente de lecturas mal definidas y tener una interpretación errónea para la sensibilidad y resistencia. Azul de alamar Es similar al método de microdilución en caldo, aquí se hacen las lecturas de manera visual es decir por los colores rosa (resistente) o azul (sensible).

PRUEBAS INMUNOLÓGICAS Determinación de antígenos: glucoroxilomananos, glucanos y galactomananos Antígeno glucoroxilomanano es la prueba más útil para el diagnóstico de criptococosis, tiene una sensibilidad muy alta (>90%). Esta prueba también es utilizada para tratamiento terapéutico.

Los glucanos son componentes esenciales de la pared celular de especies de Aspergillus, Candida; se libera al momento de la infección. Los galactomananos son exoantígenos de las diversas especies de aspergillus; son liberados a nivel sanguíneo y se pueden detectar en diversos fluidos como suero, orina, LCR y lavado bronquial, es la prueba más útil para el diagnóstico precoz de aspergilosis pulmonar invasiva y diseminada o como para tratamiento terapéutico. Es sensible y altamente reproducible. Intradermorreacciones La aplicación de antígenos fúngicos de forma intradérmica tiene como finalidad evaluar la respuesta inmunológica, se usan para fines epidemiológicos p para el transcurso de la enfermedad. Los antígenos más utilizados para el diagnóstico de micosis son histoplasmina, esporotricina (micelial para diagnóstico y levaduriforme para epidemiología). Otros tipos de antígenos extraídos de los cultivos de hongos (antígenos de aspergillus niger, alternaría alternata, etc), son más usados para la realización de cutirreacciones que evalúan inmunidad (hipersensibilidad). Fijación de complemento Representa una prueba útil para medir de manera indirecta la presencia de anticuerpos en el paciente en diversos tipos de micosis, principalmente las profundas. Son pruebas de evaluación de antígeno-anticuerpo. Se pueden hacer mediante varias técnicas inmunológicas, son útiles en enfermedades como coccidioidomicosis e histoplasmosis. El valor del complemento es directamente proporcional a la enfermedad por lo tanto puede servir para monitoreo terapéutico. Inmunodifusión radial (Ouchterlony) Es una reacción clásica de precipitación, en donde se visualiza halos de precipitación de anticuerpos producidos por los pacientes en proceso activo y agudo frente a soluciones de antígenos, ayuda a confirmar la presencia de micosis. Es importante saber que solo sirve en pacientes inmunocompetentes, ya que algunos pueden ser falsos negativos.

Bibliografía micología clínica básica, 4ta edición, alexandro bonifaz.