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• Gregory Pekynov Bustamante

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I.- OBJETIVOS Que el alumno conozca parte del material necesario en un laboratorio de microbiología. Que el alumno aprenda a manejar el material utilizado en un laboratorio de microbiología. II.- MARCO TEORICO El trabajo en un laboratorio es significativamente diferente a otros laboratorios, requiriendo de unos cuidados especiales ya que se debe trabajar en condiciones que se evite la contaminación del operatorio, de la muestras y del ambiente. El material utilizado en un laboratorio de Microbiología es muy variado y depende fundamentalmente de las líneas de trabajo a las que está dedicado. Algunos de los instrumentos más utilizados en los laboratorios, son elaborados de vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dióxido de silicio, bajo álcali, óxido bórico y vestigios de otros óxidos, lo que condiciona su escaso coeficiente de dilatación, teniendo una gran aplicación en la fabricación de materiales de laboratorio, uno de los mas conocidos es el vidrio PYREX. Así como los elaborados de distintos metales pesados como platino, mercurio, aluminio, cobre que les otorgan características como buenos conductores del calor o por que al medio ambiente son muy manejables sin alterar su composición. Instrumentos de vidrio como la probeta, la pipeta o el tubo de ensayo, y otros como el mechero Bunsen, son de los más comunes en la mayoría de los laboratorios científicos.

Constituye una de las principales herramientas para los fines que se persigue en el laboratorio. Los requisitos necesarios para que un material sea un "buen material", son: 1. Ser de buena calidad; es decir que no sean fácil de quebrarse. 2. Ser de color neutro. 3. Poseer resistencia a las acciones mecánicas y a las variaciones de temperatura así como también a los álcali-libre (no se raje). 4. Poseer bajo coeficiente de dilatación (que no pierda su forma). Tubos de Ensayo: Se emplean como recipientes de medios de cultivo.-Tubos de prueba Deben ser de vidrio neutro, paredes gruesas y equilibradas, de preferencia sin rebordes para facilitar el taponamiento. De 16 x 150 mm, 15 x 125 mm ,13 x 100 mm para estudio de fermentación –trabajos mecánicos 10 x 75 mm pruebas, estudios serológicos.

Cápsulas o Placas Petri: Cajas cilíndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el cultivo y aislamiento de microorganismos. Las más usadas son las de 10, 15 ó20 mm x 100 mm.

Placas Brewer: Para el cultivo y aislamiento de microorganismos anaeróbicos. Son idénticas alas anteriores, con excepción de las tapas que además de ser mas pesadas están adaptadas para crear anaerobiosis. Pipetas: Tubos cilíndricos delgados terminados en punta, graduados al décimo o alcentésimo de mI. Se emplean en la medición de pequeñas cantidades de líquidos. Pueden ser: Pipetas pasteur : Confeccionados de varillas de vidrio de diámetro de 4 x 20mm de 30 ó 40cm de longitud. La calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la acción directade la llama del mechero, para conseguir por estiramiento la capilaridaddeseada. Se emplea para la toma de pequeños inóculos de siembra.

Matraces y Erlenmeyers: Recipientes de forma cónica y cuello corto, volumétricos útiles para lapreparación almacenamiento de soluciones, colorantes, reactivos, medios de cultivos, etc.

y

Buchner y Kitasato. El Buchner es un embudo de porcelana, tiene una placa filtrante de agujeros grandes por lo que se necesita colocar un papel de filtro circular, que acople perfectamente, para su uso. Se emplea para filtrar a presión reducida. Su uso va unido al Kitasato, recipiente de vidrio con rama lateral para conectar con la bomba de vacío (normalmente, una trompa de agua).

Matraces Aforados o Fiolas Recipientes de forma esférica y base plana. Están calibr4ados a medidas exactas mediante un foro en la parte media del cuello del recipiente en el quese indica la medida. Se emplean para la preparación de reactivos depreferencia solución buffer. Los matraces Erlenmeyer son recipientes de vidrio de forma troncocónica que se utilizan en el laboratorio para medir o contener líquidos.

Probetas: Recipientes graduados de forma cilíndrica y capacidad variable, con base para la esterilidad. Pueden estar graduadas.

Vasos de Precipitación o Beacker: Recipientes cilíndricos y cortos, con una depresión en el margen de labocadura. Su utilidad es amplia. El vidrio debe ser resistente al calor.

Laminas porta objetos .- Un portaobjetos es una fina placa de cristal sobre el cual se disponen objetos para su examen microscópico. Sus dimensiones típicas son de 75 mm x 25 mm.

Pipetas .- La pipeta es un instrumento volumétrico de laboratorio que permite medir la alícuota de líquido con bastante precisión. Suelen ser de vidrio. Está formada por un tubo transparente que termina en una de sus puntas de forma cónica, y tiene una graduación (una serie de marcas grabadas) con la que se indican distintos volúmenes. Para realizar las succiones de líquido con mayor precisión, se utiliza, más que nada en las pipetas de doble aforo, el dispositivo conocido como propipeta.

Embudo.- son de forma cónica invertida , abierto por su base y cuyo vértice , también abierto, se prolonga en un tubo estrecho denominado pico, este ter mina cortado en bisel.

Frascos lavadores. Recipientes en general de plástico (también pueden ser de vidrio), con tapón y un tubo fino y doblado, que se emplea para contener agua destilada o desionizada. Se emplea para dar el último enjuague al material de vidrio después de lavado, y en la preparación de disoluciones. Estos frascos nunca deben contener otro tipo de líquidos. El frasco sólo se abre para rellenarlo.

Frasco cuentagotas con tetina. Normalmente se utilizan para contener disoluciones recién preparadas, se acompañan de cuentagotas para poder facilitar las reacciones de tipo cualitativo.

Escobilla y escobillón. Material fabricado con mechón de pelo natural, según el diámetro se utilizan para lavar: tubos de ensayo, buretas, vasos de precipitado, erlenmeyer, etc.

Mechero.- El mechero Bunsen es un tipo de encendedor que se utiliza en los laboratorios científicos para calentar, fundir, esterilizar y/o evaporar sustancias. Este aparato provoca llamas mediante la combustión de aire y gas, y, como fuente de calor, proporciona temperaturas no demasiado elevadas,compuesto por una base plana y pesada por la que se introduce el gas. Este último fluye en dirección ascendente a través de un tubo vertical con algunas perforaciones para que penetre el aire. Gracias al llamado ‘efecto Venturi’, la mezcla anterior se hace inflamable y sale en forma de llama por la parte superior del tubo.

Varillas .- útiles como agitadores asi como para sostener porta objetos en la cubeta de tinciones GRADILLAS .- Una gradilla es una herramienta que forma parte del material de laboratorio y su utilización es para sostener y almacenar tubos de ensayo,de todos los diámetros u otro material similar.La gradilla es utilizada más comúnmente en laboratorios clínicos. Este se encuentra hecho de madera, plástico o metal.

Asa bacteriológica.- El asa de siembra o asa bacteriológica es probablemente la herramienta más usada por el microbiólogo. Consiste en un filamento con un lazo en uno de sus extremos. El otro extremo está unido a un mango. El filamento suele ser de una aleación metálica que se calienta muy rápidamente. Esta herramienta tan simple nos permite tomar un inóculo de un cultivo bacteriano y transferirlo a otro recipiente con medio de cultivo, o a un portaobjetos para su observación microscópica.

Morteros.-Son recientes que presentan un pico de fondo cóncavo y mas o menos áspero acompañados de un pilón que posee un extremo abombado. Pueden ser de porcelana o de vidrio . sirven para pulverizar substancias solidas en bacteriología sirven básicamente para preparar colorantes reactivos

Centrífugas: Se utiliza en la separación de sólidos suspendidos en líquidos. Hay centrífugas de tamaño y velocidades variables, la velocidad, se mide en revoluciones por minuto. La velocidad a la cual sedimentaran las partículas en un líquido dependen de varios factores: Tamaño de la partícula. El peso de la partícula. La viscosidad del líquido. La fuerza gravitacional. Ultracentrifugaciónpreparativa: permite la separación de organelos separación se debe efectuar en gradiente de densidad.

(mitocondrias, etc.), la

Refrigeradoras y congeladoras Son incubadoras de temperatura fría menor de cero grados y los frigideres dedos a siete grados Autoclave Funciona por las presiones que se dará a una mayor temperatura logrando suesterilización como por ejemplo las conservas.

Horno Pasteur Es como una mufla que tiene tres paredes y la cubierta es de asbesto sirvepara la esterilización por el calor seco.

Estufas de aire caliente Al igual que el anterior es utilizado en la esterilización por el calor seco. Tienensolo dos paredes y son de forma cúbica. CONCLUCION Es muy importante haber reconocido todos los materiales a utilizar en el laboratorio y saber su utilidad para la práctica gracias al doctor ya que fue el que nos mostro cada uno de los materiales a utilizar y como debemos utilizar cada uno. En el caso del pupinel nos dijo que este alcanza solo a 37 grados , sirve para desarrollar microorganismos. El refrigerador utilizado para desarrollar hongos , en el refrigerador habían muestras con pico de flauta , nos indico también saber graduar la entrada de aire de los mecheros a gas, y como se debe manejar la caja Petri etc. CUESTIONARIO 1.- INDIQUE EL USO Y REALICE EL DIBUJO QUE FALTA DE CADA UNO DE LOS MATERIALES E INSTRUMENTOS MATERIALES PORTAOBJETOS

USOS DIBUJO Se coloca la muestra a analizar para ser observada con el microscopio

CUBRE OBJETOS

el cubre objeto sirve para cubrir lo que hay arriba del portaobjeto

TUBO DE ENSAYO

En los laboratorios se utiliza para contener pequeñas muestras líquidas, y preparar soluciones. Se utiliza sobre todo en análisis de sangre, de ahí su nombre.

TUBOS DE HEMOLISIS

CAJA PETRI

Para envasar medios de cultivo y posteriormente recibir el paso de la siembra para que finalmente podamos seguir el crecimiento y desarrollo de los microorganismos (colonias)

PIPETAS GRADUADAS

Se utilizan para soplar o aspirar líquidos y transportarlos previa medición.

VASOS PRESIPITADO

Se utiliza para contener líquidos o sustancias, para así poder disolverlas, calentarlas, enfriarlas, etc..

VIDRIO DE RELOJ

Lámina de vidrio cóncavoconvexa que se emplea para pesar los sólidos y como recipiente para recoger un precipitado sólido de cualquier experiencia que se introducirá en un desecador o bien en una estufa.

2. QUE OTROS TIPOS DE MATERIALES E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO UTILIZADOS EN MICROBIOLOGIA SE PUEDEN AÑADIR A LOS YA ENUNCIADOS R.- Microscopio óptico, matraces, Estufa de incubación, aplicadores, gotero, mechero, pizeta, centrifugadora, embudo, homogeneizador, mortero, cubeta de tinción, tubo conico, tubo de hemolisis, tubo precipitado, probeta, tubo capilar, refrigerador, mesa de laboratorio ,vitrinas y armarios. 3. PROCEDIMIENTOS DE LAVADO Y SECADO Y PROTECCIÓN DE LOS MISMOS LAVADO GENERAL DE MATERIAL El analista debe verter los residuos líquidos en el tanque destinado para tal fin una vez finalizado el procedimiento analítico, con el fin de efectuar el proceso de tratamiento que puede ser neutralización, desactivación y/o dilución de residuos líquidos para verter los desechos a la cañería. Enjuagar todo el material con abundante agua de la llave antes de usar detergente, utilizando el lavadero corriente. Introducir el material en una ponchera y lavarlo con detergente biodegradable al 5%, frotando con un churrusco adecuado para cada elemento. Enjuagar con abundante agua de la llave hasta asegurarse de haber eliminado toda traza de detergente. Dejar escurrir. Enjuagar con abundante agua destilada. Escurrir en un recipiente adecuado (escurridores preferiblemente de teflón) y proteger con papel kraft las superficies. Secar el material a temperatura ambiente o en estufa. El material volumétrico NO DEBE SECARSE EN ESTUFA. Guardar el material seco en el lugar definido que sea un sitio libre de polvo. Proteger el material de la contaminación tapando con papel kraft la boca y los orificios de cada elemento en forma individual, ajustando el papel con bandas de caucho

Bibliografía: Preparación de material de laboratorio capítulo II de manual de microbiología (UMSA) http://www.quimicaweb.net/ciencia/paginas/laboratorio/material.html http://es.scribd.com/doc/17102226/2-LABORATORIO-DE-MICROBIOLOGIA-I http://www.slideshare.net/guest5ff2f3/materiales-microbiologia

MATERIAL E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO EMPLEADOS EN MICROBIOLOGIA

UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE NOMBRE: Virginia Evelin Caviña Quisbert. DOCENTE: DR. José Antonio Cabrera Pérez GRUPO: D-1

12-03-14