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• Carlos Loera

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GLUCOSE llquicolor

Calculo de la concentracion de glucosa

Metodo GOD-PAP

C = 100 x

L'iA

Prueba enzirnatica colorirnetrica por glucosa Metodo sin desproteinizacion del estuche 10260 4x100ml 10121 1000 ml 10123 9x3ml

[mg/dl]0

t1.A C = 5,55 x

muostra

rnuestra

[mmol/l]

Presentacion

IREFI

Estuche completo Estuche completo Estandar

Metod01 La glucosa se determina despues de la oxidacion enzlrnatica en presencia de glucosa oxidasa. EI peroxide de hidroqeno formado reacciona bajo la catalisis de peroxidasa con fenol y 4aminofenazona formando un complejo rojo-violeta usando la quinoneimina como indicador. Principio de la reaccion Glucosa + 02 + H20

GOD ---------7

acido gluconico + H202 POD

2 H202 + 4-aminofenazona + fenol ------7 quinoneimina + 4 H20 Contenidos IREFI 10260 4x100ml 1 x3ml

IRGTI ISTDI IRGTI

10121 1 x 1000 ml 1 x 3 ml

10123 9 x3 ml

4 x 100 ml 01000 ml Reactivo enzirnatico Buffer fosfato (pH 7,5) 0,1 molll 4-aminofenazona 0,25 mmol/l Fenol 0,75 mmol/l Glucosa oxidasa > 15 KU/I Peroxidasa > 1,5 KU/I Mutarotasa > 2,0 KU/I Estabilizantes :3 mi Estandar Glucosa 100 mg/dl 0 5,55 mmol/l

Caracteristicas de la prueba Linearidad La prueba es lineal hasta una concentracion de glucosa de 400 mg/dl 0 22.2 mmoi/i. Si la concsntraclon de glucosa en la muestra es superior a estos limites diluir la muestra 1+2 con agua destilada y repetir la determinacion. Multiplicar el resultado por 3. Los datos tipicos de ejecucion de la prueba pueden ser encontra­ dos en el informe de verificacion, accesible via www.human.de/data/gb/vrlsu-gllq.pdf 0 www.human-de.com/data/gb/vrlsu-gllq.pdf Valores normales 2 Suero, plasma (en ayunas): 75-115 mg/dl 0

4,2-6,2 mmol/l

Control de calidad Pueden ser empleados todos los sueros con valores de glucosa determinados por este rnetodo. Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal HUMATROL 0 nuestro suero de origen Humano SERODOS como control de calidad. Automatizacion

Proposiciones para la aplicacion de los reactivos sobre analizadores estan disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la aplicacion en su propia responsabilidad. Notas Sueros ictericos interfieren en la prueba y no pueden ser usados como muestras. Los trigliceridos hasta 2500 mg/dl, la hemoglobina hasta 500 mg/dl y el acido ascorbico hasta 20 mg/dl no interfieren en la prueba. -- Literatura 1. Barham, D., and Trinder, P., Analyst 97 (1972) 2. Teuscher, A., and Richterich, P , Schweiz med. Wschr. 101, 345 Y 390 (1971)

Preparacion de los reactivos IRGTIy ISTOIestan listos para uso. Estabilidad de los reactivos Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad, aun despues de abrir, cuando se almacenan de 2...BoC. Despues de abiertos evitar la contarninacion. IRGTIes estable por 2 semanas de 15...25°C. Muestras Plasma, suero. La glucosa es estable por 24 horas de 2...BoC, si el suero 0 plasma es separado dentro de 30 minutos despuss de la toma de la muestra de sangre. Ensayo Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medicion:

500 nm, Hg 546 nm. 1 cm 20...25°C 0 3rC Frente a un blanco de reactivo. Se requiere un blanco de reactivo por serie.

Esquema de pipeteo Macro Pipetear en las cubetas ISTOlo Muestra IRGTI

ISTOlo Muestra

Blanco de reactivo

Semi-micro Blanco de reactivo

ISTOlo Muestra

----20 III 10 III 2000 III 2000 III 1000 III 1000 III Mezclar, incubar por 10 minutos de 20...25°C 0 5 minutos a 37°C. Medir la absorbancia del ISTOIy las muestras frente a un blanco de reactivo antes de 60 minutos (L'iA).

SU·GLLQ2 INF 1026002 E 09-2005-18

(E

Human Gesellschaft Iur Blochemica und Diagnostica mbH Max-Planck-Ring 21 - 0-65205 Wiesbaden - Germany Telelon: +49 6122 9988 0 - Telelax: +49 61229988100 . eMail: [email protected]

liquicolor

TRIGLVCERIDES

mono

Esquema de pipeteo Por favor usar sola mente el estandar de Trtgllceridos de HUMAN incluido en el kit 0 disponible por separado: IREF110163.

Metodo GPO - PAP Prueba enzirnatica colorimetrica para trigliceridos con factor aclarante de lipidos

BR

(LCF)

1000

Presentaclon del estuche IREFI 10720P

9 x 15 ml

Kit completo

10724

4x100ml

Kit completo

10725

3 x 250 ml

Kit completo

10163

9x3 ml

Mezclar e incubar por 10 minutos entre 20...25°C 0 por 5 minuto Medir la absorbancia de la muestra (Ll.Amu,,",) y del estandar ( contra el blanco reactivo antes de 60 minutos.

3rc.

calculo de la concentraclen de trigliceridos

Estandar IlA C = 200 x

Metodo tos-trlghcertdcs-sen deterrninades despues-de-hidf6Iisis-en~im-atica-cen lipasas. EI indicador es quinoneimina formada a partir de peroxide de hldrogeno, 4-aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalitica de peroxidasa. Principio de la reaccion tipasas Trigllcertdos ----~

Glicerol-3-fosfato + ADP

www.human.de/data/gb/vr/su-trimr.pdfo www.human-de.com/data/gb/vr/su-trimr.pdf

fosfato dihidroxiacetona + H,O, Quinoneimina + HCI + H,O

Interpretacion clinica para riesgo ateroesclerotico Sospechoso: sobre 150 mg/dl o 1,71 rnrnol/l

+ 4-clorofenol

Elevado:

POD

Buffer PIPES 4-chlorofenol 4-aminofenazona lones de Magnesio --ATP

50 5 0,25 4,5 2

Lipasas Peroxidasas Glicerol Kinasa Glicerol 3-fosfato oxidasa

mmol/I rnrnol/l mmol/I mmol/I mmol/~I-

;::1300 ;:: 500 ;::400 ;:: 1500

U/I U/I U/I U/I

3 ml Estandar Trigliceridos

200 mg/dl

0

2,28 mrnol/l

Preparacion del reactico y estabilidad IRGTly ISTDIestan listos para usar. Los reactivos se mantienen estables hasta la fecha de vencimiento, aun despues de abrir, si se almacenan entre 2...8°(. Entre 20...25°C, ellRGTlse mantiene estable por 4 semanas. Se debe evitar la contamlnacion. Protegir de la luz.

Nota:

0

plasma EDTA.

sobre 200 mg/dl

a 2,28 mmol/l

Control de calidad Se pueden utilizar todos los sueros control con valores de trigliceridos determinados por este rnetodo.

Contenidos IRGTI 15 ml; 100 rnl o 250 ml Monoreactivo

Estabilidad:

[mrnol/l]

Las caracteristicas de la ejecucion de esta prueba pueden ser encontradas en el informe de vertficacion, accesible via

----~

Muestra Suero, plasma heparinizado

2,28 x

Glicerol + Acidos Grasos

Glicerol-3-fosfato + 0, ----~

ISTDI

=

La prueba es lineal hasta concentraciones de tnglkerldos de 1000 mg/dl o 11,4 mmol/l. Muestras con concentradon superior deben ser diluidas 1 + 4 con solucion salina (0,9%) y repetirse. Multiplicar los resultados por 5.

GPO

H,O, + 4-aminoantipirina

[mg/dl]

CaracteristicaS1lela ejecuci'61"­ Linealidad

GK

Glicerol + ATP---~

tl.A Muestra

Muestra

Nosotros recomendamos el uso de nuestros sueros control HUMATROLde origen animal y SERODOSde origen humano. __

~utomatizaciQ!I _ Proposiciones para la apllcaclon de los reactivos sobre analizadores estan disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la aplicacion en su propia responsabilidad. Notas 1. Para corregir el glicerollibre, restar 10 mg/dl (0,11 mmol/I) del valor de trigliceridos calculado. 2. No interfieren en la prueba valores de hemoglobina hasta 150 mg/dl 0 de bilirrubina hasta 40 mg/dl. Ascorbato > 4 mg/dl puede dar resul­ tados falsamente bajos. 3. Los reactivos contienen azida de sodio (0,05%) como preservativo. No ingerir. Evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas. Literatura 1. Schettler, G., Nussel, E.,Arb. Med. Soz. Med. Prav. Med. 10, 25 (1975) 2. Jacobs, N. J., VanDemark, P. J., Arch. Biochem. Biophys. 88, 250-255 (1960)

3 dias entre 2...8°C

3. Koditschek, L. K., Umbreit, W. W., J. Bacteriol. 68,1063-1068 (1969)

4 meses a -20°C

4. Trinder, P.,Ann. Clin. Biochem. 6, 24-27 (1969)

Las muestras lipernicas generalmente generan turbidez en la mezcla del reactivo con la muestra, 10 que /leva a resultados elevados falsos. ta prueba de TRIGLYCERIDES liquicolor ""?". evita estos resuItados elevados fa Isos a traves del factor acla rante de lipidos (LCF). EI LCF aclara completamente la turbidez causada por muestras lipernicas.

Ensanyo Longitud de Onda:

500 nm, Hg 546 nm

PasoOptico:

1 cm

Temperatura:

20...25°C 0

Medicion:

Contra blanco de reactivo (BR).Solo se requiere un blanco de reactivo por serie.

SU-TRIMR

INF1072401 E

02-2009-11

(E

3rC

Human Gesellschaftfur Biochemicaund Diagnostica mbH Max-Planck-Ring21· 65205 Wiesbaden. Germany Telefon +49 6122-9988-0· Telefax +49 6122-9988-100· e-Mail [email protected]

HDL CHOLESTEROL liquicolor

En plasma no se deben exceder las siguientes concentraciones de anticoagulante: EDTA-2Na < 1000 mgjl; Na-citrato < 5000 mgjl; heparina < 750 mgjl; NaF < 2000 mg/I, Na-oxal. < 3000 mg/l,

Prueba directa hornogenea para la determinacion de colesterol HDL Prueba enzirnatica colorimetrica

Ensayo Longitud de Onda: Paso de luz: Temperatura: Medicion:

Presentacion del estuche !REFI

80ml 200 ml

10084 10284

Estuche completo Estuche completo

Hg 578 nm, 593 nm, (570 a 610 nm) 1cm 3TC contra blanco de reactivo. Se necesita un blanco por serie.

Procedimiento (manual) Atemperar 105 reactivos y las cubetas a 3TC. La temperatura mantener constante (± 0,5°C) durante la prueba.

Principio HDL CHOLESTEROLliquicolor es una prueba enzimatica hornogenea para la determinacion cuantitativa de Colesterol HDL (HDL). EI HDL es conocido como un componente lipidico protector contra las enfermedades cardin­ vasculares (ECV).Junto con el Colesterol LDL es de importancia diagnos­ tica en la determinacion del riesgo individual de ECV.

se debe

Blanco de reactivo (BR)

Pipetear en las cubetas Agua !CAL!/ muestra

Metodo La prueba combina dos pasos especificos: En el primer paso se eliminan y destruyen 105quilomicrones, y 105colesteroles VLDL y LDL por reaccion enzimatica. En el segundo paso, se determina el colesterol restante de la fraccion HDL, a traves de reacciones enzimaticas bien establecidas en presencia de surfactantes especificos para HDL. Principio de las reacciones 1er paso: LDL,VLDL, Y Quilomicrones

!ENZ!

Mezclar cuidadosamente, incubar a 3TC y a 105 5 minutos leer la absorbancia !1A de !CAL!y de las muestras contra el BR.L1AfCALl/muestra = A -A BR

(HE + (HO

Colestenone + H,O,

Calculo Calcular la concentraclon de la muestra de la siguiente forma:

2 H,O +0,

C muestra = C ~

condiciones especlflcas

t1.A

Catalasa

2H,O,

muestra

x

(mg/dl)

(HE + CHO

Colestenone + H20,

2do paso: HDL

Factor de conversion- C (mg/dl) x 0,02586 = C (mmol/I)

Surfactantes Especificos

H,O, + Crornogeno

Caracteristicas de la ejecuclon Linearidad: Hasta 150 mg/dl de HDL. Ellimite de linearidad depende de la aplicacion especifica del analizador. Si la concentracion de HDL excede el rango de rnedicion, diluir la muestra 1 + 1 con sotucion salina (0,9%) y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 2.

peroxidasa

Pigmento qui nona

Contenido, cornposicion de los reactivos en la prueba !REF! 10084 10284 ~

1x60ml

1x150ml

!SUS!

1 x 20 ml

1 x 50 ml

!CAL!

1 x 4 ml

1 x 4 ml

!ENZ!

Enzimas (tapa blanca) Buffer de Good, pH 6,6 (25°C) Cloruro de sodio Colesterol esterasa Colesteroloxidasa Catalasa600 kU/1 Ascorbato oxidasa N-(2-hidroxi-3-sulfopropil) -3,5Dimetoxianilina (HDAOS) Preservantes Sustrato (tapa verde) Peroxidasa 4-Aminoantipirina (4-AA) Buffer de Good de pH 7,0 (25°C) Preservantes Detergentes Azida de sodio Calibrador Colesterol

--

100 rnmol/l 170 mmol/I 1400 U/I 800 U/I 3000 U/I 0,56 mmol/I 0,1 % p/v 3500 U/I 4 mmol/I 100 mmol/I 0,1 % p/v 1,4 % p/v 0,05 % p/v

--

Interferencia: No se observe interferencia con trigliceridos hasta __ -.1200_m&l-dJ,_b.em.ogJo.b.it:!a...has.ta...SQQ_mgl-dl.~b.iJifJ.!'! bina, b.ast.a3.Q_mgLd'-acido ascorbico hasta 50 mg/dl y muestras ligeramente turbias. Diluir las muestras con trigltcertdos que excedan 105 1200 mg/dl con solucion salina (0,9%) 1 + 1 Y rnultiplicar los resultados por 2. Las caracteristicas de la ejecucion de esta prueba pueden ser encontradas en el informe de verificacion, accesible via www.human.de/data/gb/vr/su-hdldd.pdfo www.human-de.com/data/gb/vr/su-hdldd.pdf Valores de referenda 2 < 35 mg/dl « 0,9 mmol/I) factor de riesgo para ECV

> 60 mg/dl (> 1,54 mmol/I) poco riesgo para ECV Este rango se da solo como orientacion, cada laboratorio debe establecer sus propios valores de referencia ya que factores como: sexo, dieta, edad, ubicaci6n geogrMica y otros, pueden afectar 105valores esperados. Control de ca lidad Se pueden emplear todos 105 sueros control de origen humane con valores de HDL determinados por este rnetodo.

Automatizacion para la concentraci6n ver etiqueta en el frasco

Preparacion del reactivo y estabilidad !ENZly !SUS!estan listos para usar. Estabilidad: Despues de abrir 105 reactivos se conservan estables por 2 meses cuando se almacenan entre 2...8°C. Evitar la contaminacion. No congelar. No mezclar las tapas. Proteger !ENZ!de la luz. !cALi: Reconstituir el contenido del frasco con exactamente 4 ml de agua destilada libre de gerrnenes, cerrar el frasco y agitar cuidadosamente para disolver todo elliofilizado. Evitar que se forme espuma. Dejar reposar por 30 minutos al rnenos antes de usar.

La prueba se puede realizar en modo cinetico de tiempo analizadores.

fijo

en

Proposiciones para la aplicaci6n de 105reactivos sobre analizadores estan disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la aplica­ ci6n en su propia responsabilidad. Literatura 1. Gordon, T. et al., Am. J. Med. 62, 707 (1977) 2. Izawa, 5. et a!., J. Med. and Pharm. Sci. 37, 1385-1388 (1997) 5U-HDlDD

INF 1008401 E

(E

07-2008-14

Estabilidad: 10 dias entre 2...8°C. Si se necesita, el calibrador recien preparado se puede dividir en alicuotas y mantener congelado a -20°C por un maximo de 30 dias. Congelar y descongelar una sola vez. Mezclar cuidadosamente despues de descongelar.

Human

Muestra Suero, plasma Estabilidad: Recomendamos analizar directamente despues de tomar la muestra, si esto no es posible, almacenar el suero a -20°C por varias semanas. Evitar congelar y descongelar varias veces.

Human Gesellschaftfur Biochemicaund DiagnosticambH Max-Planck-Ring21·65205 Wiesbaden· Germany Telefon +49 6122-9988-0·

Telefax +49 6122-9988-100·

e-Mail [email protected]

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