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Diversificación Productiva y del Fortalecimiento de la Educación UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL FACULTAD DE MEDICINA “HIPÓLITO UNANUE”
CURSO
: Microbiología
ALUMNO Roxana sofia
: Soca Chuquino,
DOCENTE
: Dr. Leyva
AÑOS DE ESTUDIO
: Tercero
Lima- Perú 2015
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FACULTAD DE MEDICINA HUMANA-UNFV
Contenido PRÁCTICA #1...................................................................................................... 2 Fagocitosis IN VITRO........................................................................................ 2 Fagocitosis IN VIVO.......................................................................................... 3 RÁCTICA #2........................................................................................................ 5 Reacción de precipitación................................................................................ 5 PRACTICA 3........................................................................................................... 7 hemoaglutinación determinada: grupo sanguineo...........................................7 PRACTICA 4........................................................................................................... 9 Poder bactericida del suero.............................................................................. 9 PRACTICA 5......................................................................................................... 12 Prueba de fijación de complemento...............................................................12
INFORME INMUNOLOGÍA
DR. LEYVA
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PRÁCTICA #1 Objetivos de la práctica:
Reconocer al macrófago en etapa de fagocitosis Se mide la capacidad del sistema inmune frente a la presencia de microorganismos Observar el mecanismo fagocitario dependiente del tiempo.
Fagocitosis IN VITRO Materiales: cultivo de candida albicans anticoagulante wintrobe colorante de Wright Procedimientos El procedimiento fue según lo expuesto en la guía de prácticas, con la excepción que se hizo 2 centrifugaciones al tubo de sangre con candida albicans. Resultados Después del procedimiento se observó la presencia de una interfase de capa leucocitaria, esta se llevó al microscopio mediante métodos descritos en la guía de práctica y se pudo observar la presencia de macrófagos en distintas etapas: En la etapa de quimiotaxia Formación de fagosoma En la etapa de muerte y digestión.
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Fagocitosis IN VIVO Materiales: Cepa de candida albicans 1 pericote Procedimientos El procedimiento fue según lo expuesto en la guía de prácticas; con el asesoramiento del doctor de prácticas se realizó la inoculación en el pericote y después la respectiva autopsia sacando improntas de hígado, corazón y liquido peritoneal.
Resultados
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La impronta fue llevada al microscopio y se logró observar células facociticas en respuesta a la inoculación del antígeno. FUENTE Sangre periférica Cavidad peritoneal hígado
PRESENCIA DE CELULAS FAGOCITICAS POSITIVO NEGATIVO √ √ √
TIPO DE CELULAS FAGOCITICAS Monocitos y PMN Macrófagos maduros PMN
Aplicación de la práctica In VIVO y en IN VITRO Como podemos darnos cuenta, tanto en el experimento realizado in vivo in vitro los macrófagos son las células que se ven inmiscuidas en el proceso de la fagocitosis, esto comprueba lo que dice la literatura que la inmunidad innata es la primera línea de defensa frente a microorganismos extraños que entran por primera vez a nuestro organismo por cualquier puerta de entrada. Faltaría hacer un experimento en el cual se demuestre que los macrófagos también están inmiscuidos en la fagocitosis de Ags que ya han entrado a nuestro organismo y que ya se ha creado memoria inmunológica
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RÁCTICA #2 Objetivos de la práctica: Demostrar la presencia de la proteína C La reacción entre anticuerpo y antígeno
Reacción de precipitación Materiales:
tubos capilares suero bases de plastilina suero
Procedimientos El procedimiento fue según lo expuesto en la guía de prácticas sin ninguna excepción. Resultados La medida del precipitado antígeno- anticuerpo fue de 2mm
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El resultado de la lectura de cualquier precipitado antígeno anticuerpo se clasifica de la siguiente manera:
No precipitado 1 mm de precipitado 2 mm de precipitado 3 mm de precipitado 4 mm de precipitado 5 mm de precipitado
negativo 2 cruces 3 cruces 4 cruces 5 cruces 6 o más cruces
Discusión la tabla anterior nos indica el tipo de lectura que se debe realizar, siguiendo esto podemos decir que nuestra lectura fue de 2 mm de precipitado lo que indica que la proteína C se encuentra presente en la sangre y así se puede inferir que el paciente está desarrollando una enfermedad y está en sus etapas iniciales pro la inflamación . Todas las pruebas serológicas tienen 2 respuestas una cuantitativa y otra cualitativa. La cuantitativa mide la concentración del anticuerpo y la cualitativa solo la calidad y la presencia de la reacción; por eso si en una primera instancia la cualitativa sale positivo se debe hacer una cuantitativa así se sabrá según los niveles de concentración de antígeno que tan reciente o antigua es la enfermedad.
Aplicación de la práctica
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Debido a que la proteína c reactiva es producida por el hígado frente a una inflamación, aunque no es un examen específica puesto que no revela el lugar de la inflamación nos ayudara en: 1. determinar si el tratamiento de un antiinflamatorio está obteniendo algún beneficio en el tratamiento 2. verificar exacerbación de enfermedades inflamatorias
PRACTICA 3 Objetivos de la práctica:
determinar los cuatro grupos sanguíneos en sangre del sistema ABO.
Hemoaglutinación determinada: grupo sanguíneo Materiales: Suero Anti A, Anti B y anti D (RH) Procedimientos
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El procedimiento fue según lo expuesto en la guía de prácticas, sin ninguna excepción. Resultados Se tomó la muestra de 2 alumnos y el resultado fue
ALUMNO A ALUMNO B
-
-
SUERO ANTI A +
SUERTO ANTI B O
SUERO ANTI D +
GRUPO SANGUINEO O
La siguiente imagen muestras: Se observa que hubo aglutinación (especie de grumos en la muestra mezclada) con el antisuero D y que no hubo aglutinación con el antisuero A y B. esto indica que no hay presencia de antígenos A y B pero si antígeno D en los hematíes. Así el resultado de los 2 alumnos es grupo sanguíneo O y Rh+
Aplicación de la práctica La principal aplicación de esta práctica es el conocimiento del tipo de sangre, según sistema ABO que tiene nuestro pacientes en una emergencia por lo fácil y rápida que es esta prueba, así en un momento de emergencia donde al
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paciente se le desconoce el tipo de sangre y se requiera una transfusión de sangre el procedimiento más sencillo es este.
PRACTICA 4 Objetivos de la práctica:
Comprobar el efecto de defensa del organismo humano mediante la demostración por efecto del suero
Poder bactericida del suero Materiales: 9 placas Petri Cultivo de caldo de E. Coli suero Procedimientos El procedimiento fue según lo expuesto en la guía de prácticas, sin ninguna excepción Resultados El resultado con E.coli Vs suero a diferentes condiciones
Condiciones del suero 56 ° C
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C. N
Sol Salina
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concentración
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104
105
106
Discusión Se observó que a cuando el suero esta acondiciones normales cumple su poder bactericida, pero cuando este sufre alguna variación de su temperatura no va a cumplir el papel fundamental que tiene en su totalidad tal como ocurrió cuando se le calentó a 56°C. El suero a mayor concentración en condiciones normales va a permitir un menor crecimiento del antígeno. Salvo que estemos frente a un germen altamente virulento. En conclusión diremos que el suero humano a CN se activa favoreciendo al huésped teniendo poder antimicrobiana, fagocitado al germen cumpliendo su poder anti bactericida; pero por el contrario si existe alguna modificación de la temperatura del suero el complemento que está constituido por proteínas se desnaturalizara y perderá su poder favoreciendo al agente.
Aplicación de la práctica Esta práctica ayudara en el conocimiento del poder bactericida del suero y la actividad del complemento de un paciente.
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Cuestionario: 1. cuáles son los factores del complemento responsables de la citolisis El sistema del complemento no es una simple proteína sino un sistema funcional de proteínas plasmáticas y una pequeña proporción de proteínas de membrana que interaccionan unas con otras de una forma regulada y participan en muchas de las funciones efectoras de la inmunidad humoral y de la inflamación (2-3). El hepatocito es el principal productor de factores del complemento, continúan los macrófagos activados, el tejido epitelial intestinal y el genitourinario Para que el complemento lleve a cabo sus funciones es necesario la formación y activación de las proteasas C3 y C5 convertasas.
Al final las 3 vías llegaran a la activación de la C5 que empezara con una cascada activando a la C6, 7, 8,9 y produciéndose la lisis de las membranas. 2. que tipos de anticuerpos han actuado en el experimento La Ig G y M
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PRACTICA 5 Objetivos de la práctica:
Observar la utilización del sistema de complemento, si se ha fijado o no.
Prueba de fijación de complemento Materiales: suero problema sistema hemolítico Procedimientos El procedimiento fue según lo expuesto en la guía de prácticas, sin ninguna excepción Resultados
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El resultado se resume en el siguiente cuadro: tubo Control Control Control Control
positivo negativo del antígeno del sistema hemolítico
resultado No hemolisis Hemolisis total No hemolisis (parcial) No hemolisis ( parcial)
Fundamento La activación (“fijación”) del complemento por el anticuerpo unido al antígeno hace que se generen complejos de ataque de membrana. Si el anticuerpo se une a eritrocitos, éstos se destruyen y sobreviene hemólisis. La fijación del complemento comprende 2 sistemas 1. el sistema prueba: suero problema, antígeno especifico y complemento 2. suero indicador: eritrocitos y hemolisina (Ac. Anti eritrocitos)
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Aplicación Se usa para diagnósticos serológicos de brucelosis y perineumonía contagiosa bovina (micoplasma), histoplasmosis.
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