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PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DEL ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS

LABORATORIO # 2 DATOS INFORMATIVOS ASIGNATURA: BIOQUÍMICA NIVEL: 6 NOMBRES: DANIEL BOLAÑOS JUAN FRANCISCO RODAS TITULO DE LA PRÁCTICA: EXTRACCION E HIDROLISIS DE ALMIDONES FECHA DE REALIZACION DE LA PRÁCTICA: 11 DE FEBRERO DE 2014

1.

Objetivos  

Extraer glucógeno de una muestra de hígado de pollo. Hidrolizar el glucógeno y almidón a sus principales formas es decir sus monosacáridos constituyentes.

2.

Resumen

3.

Introducción

El glucógeno posee una estructura ramificada con cadenas lineales de restos consecutivos de glucosa, unidos por enlaces α (1 -4), y por enlaces α(1-6) en los puntos de ramificación. El resultado es una estructura en abanico con un extremo reductor y muchos no reductores. La hidrólisis de estos enlaces glucosídicos puede ser catalizada por ácidos minerales o enzimas. En la hidrólisis ácida los enlaces se rompen al azar, conformación intermediaria de todos los posibles oligosacáridos y la conversión final de éstos en glucosa. La hidrólisis de los enlaces glucosídicos del glucógeno puede ser también llevada a cabo por la enzima α-amilasa, que cataliza la hidrólisis específica de los enlaces α (1-4) (no son afectados los enlaces α(1-6). Los productos finales de la hidrólisis enzimática del glucógeno son glucosa, maltosa e isomaltosa. El almidón es el carbohidrato de reserva más abundante en los tejidos vegetales. Se encuentra en grandes cantidades en los tubérculos y semillas de cereales y leguminosas, de donde puede obtenerse fácilmente en forma de gránulos característicos por su fórmula y tamaño.

El almidón es un polisacárido que contiene alrededor de un 20% de una fracción insoluble y un 80% de una fracción soluble denominada amilopecticina. Ambas fracciones están constituidas por unidades de α-D-Glucosa pero difieren en el tamaño y configuración molecular. Todos los polisacáridos son hidrolizados en sus constituyentes monosacáridos por la acción de ácidos diluidos, por tanto se obtendrá la D-Glucosa como producto final. Parte experimental Materiales:  Tubo de ensayo Mechero  Centrifuga  Vasos de precipitación. Reactivos:  Reactivo de Benedict,  KOH al 30%  Na2SO4 al 15%  H2SO4 5N,2N,0,4M  Fenolftaleína  Solución de almidón 1%  Solución de yodo  Etanol absoluto  Agua

destilada

Procedimiento Extracción de glucógeno de una muestra hepática

Pesar aproximadamente 0,5g de higado de pollo y colocar en un tubo de ensayo de 13mL.

Centrifugar glucógeno , desechar el líquido y retener el precipitado color marrónblanco.

Lavar el precipitado 3 veces con 1mL de etanol y una cuarta vez con 1 mL de HCl 0m1N (desechar el líquido).

Añadir 2mL de KOH al 30%, y calentar en baño maría el tubo por 30 minutos.

Dejar en reposo el tubo por 15-20 minutos para provocar precipitación de glucógeno.

Poner 1mL de agua destilada y pasar el contenido en un tubo más grande.

Centrifugar 5 minutos , para eliminar los restos de tejido no digerido.

Agregar 0,2mL de Na2SO4 al 15% y 4mL de alcohol etílico.

Hidrólisis ácida del sedimento del tubo

Añadir 1mL de HCl 5N al contenido del tubo grande del paso anterior, calentar 45 minutos en baño maría tapando el tubo

Retirar el tubo del baño dajar enfriar y añadir, añadir 1mL de NaOH 5N

Adicionar 3mL del reactivo de Benedict y calentar en baño maría durante 8 minutos , un precipitado rojo indica prueba positiva.

Hidrólisis ácida del almidón

Colocar 20mL de solución de almidón al 1% en un tubo de ensayo y agregar 0,5mL de HCL colocar en baño maría

Colocar 0,5 mL de lasolución de yodo y 0,5 mL de almidón hidrolizando y comprobar que la prueba de yodo sea negativa. Repetir el proceso cada 15 minutos.

Cuando la prueba sea negativa(coloración amarilla), poner 0,5 mL de almidón hidrolizado , con 1 mL de NAOH 0,4M y 2,5 mL de bénedict

Colocar los tubos 8 min por agua hirviendo y observar el precipitado rojo.

Realizar lo mismo en un tubo con almidón 1% sin hidrolizar

Cuestionario



Realice representaciones esquemáticas para: amilosa, amilopectina, glucógeno y celulosa

Glucógeno



Haga un cuadro con los resultados de la prueba del yodo a diferentes tiempos y anote el tiempo que tardó la prueba de Benedict en dar positiva.



Según los resultados del cuadro anterior, ¿cuánto tiempo tardó la solución de almidón en hidrolizarse?



¿Qué tipo de enlaces es capaz de romper el HCI? ¿Por qué?

El HCl puede romper enlaces glucosídicos, por esa razón se lo emplea en hidrólisis. Debido a que rompe enlaces al azar, con formación intermediaria de todos los posibles oligosacáridos y la conversión final de éstos en glucosa. Esa es la razón principal por lo que se emplea un ácido fuerte previamente calentado.



Consulte el proceso de fabricación del papel celofán

El celofán se fabrica a partir de la disolución de fibras de caña, algodón o madera. De esta disolución se obtienen una solución viscosa, la cual pasa por un proceso de extrusión y posteriormente es bañada por un ácido que la convierte en celulosa. El celofán pasa a través de una ranura mientras que el rayón pasa por un orificio.

Bibliografía 

Química de Alimentos: Manual de laboratorio tomado de: http://books.google.com.ec/books?id=8VpJ8foyDiIC&pg=PA7&lpg=PA7&dq=extraccion+e+ hidrolisis+del+GLUCOGENO&source=bl&ots=q0zHpW9j_f&sig=GGEK5SnvlohSLrE1vfbf_VT5 IRs&hl=es&sa=X&ei=KECU_PUE8_gsATWzoCoBQ&ved=0CEEQ6AEwBA#v=onepage&q=extraccion%20e%20hidr olisis%20del%20GLUCOGENO&f=false

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Hidrólisis de Disacáridos y/o Polisacários (3ºBD), tomado de: http://quimicacsfisicas.blogspot.com/2012/05/hidrolisis-de-disacaridos-o.html Quiminet.com, Papel celofán, Tomado de: http://www.quiminet.com/articulos/que-es-elcelofan-y-como-es-su-proceso-de-fabricacion-2684185.htm

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