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• Adriana Ramos

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

CURVA TIPO DE AZÚCARES REDUCTORES Bañuelos Ramos Adriana. Gutiérrez Vences Luis Antonio

INTRODUCCIÓN. La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas y las condiciones que las modifican, así como sus mecanismos de reacción. La curva tipo de azucares reductores es un método de química analítica empleado para medir la concentración de una sustancia en una muestra por comparación con una serie de elementos de con serie de elementos de concentración conocida. Se basa en la existencia de una relación en principio lineal entre un carácter medible (absorbancia) y la variable a determinar (concentración).

Grupo: 3IV1

CÁLCULOS (EJEMPLO):

Sección: 2

DE

AZÚCAR

REDUCTOR

0.005 𝑀 𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 0.005 𝑀 𝐹𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 0.010 𝑀

Tubo 1: 0.010 M x X= 1 µmol

-----------------------

1000 ml 0.1 µmol

Grafica de Absorbencia contra Concentración de azúcar reductor:

OBJETIVOS.

Curva Tipo de Azucares Reductores

 Obtener una curva de calibración para posteriormente transformar las lecturas de absorbancia en micromoles de azúcar.

RESULTADOS. Tabla de Absorbencia: Tubo

Absorbencia

T 1 2 3 4 5

0 0.107 0.175 0.388 0.670 0.875

Azúcar reductor (μmoles)/2ml 0 1 2 4 8 10

Absorbencia

600 400 200 0 0 -200

5

10

15

Azúcar Reductor

1

ANÁLISIS DE RESULTADOS Y DISCUSIÓN.

La curva tipo se realizó para tener un punto de comparación que nos será útil en las siguientes prácticas y así conocer la cantidad correspondiente de micromoles de azúcar reductor y a partir de esto calcular la actividad de la enzima en Unidades de Invertasa. Por esto es que es de gran ayuda la curva tipo. La glucosa es un azúcar reductor debido a que presenta un grupo carbonilo intacto y que a través del mismo puede reaccionar y reducirse por lo que se utiliza para la identificación de la actividad de la Invertasa sobre la sacarosa. Viene combinada la glucosa con la fructosa ya que está ultima al estar en un pH alcalino se isomeriza en glucosa (equilibrio ceto-enolico) por lo que en vez de tener 0.05 M se tendrá 0.01 M de glucosa (azúcar reductor). El 3,5-DNS se utiliza para la identificación de azucares reductores ya que la glucosa reduce el DNS, formando 3-nitro-5-aminosalicilato y 3-amino5-nitrosalicilato, mientras que la glucosa se oxida formando el D-Gluconato. Gracias también a este reactivo se mantiene un pH alcalino para que se isomeriza la fructosa. Se necesita que haya un calentamiento para que se pueda llevar la reacción de óxido-reducción entre la glucosa y el DNS lo que provocara que se presente una coloración en base a la cantidad de glucosa que se encuentre en el medio.

Imagen 1. Preparación de los tubos para medir la absorbencia.

CONCLUSIONES

La cantidad de azúcar reductor es directamente proporcional a la absorbancia.

BIBLIOGRAFÍA Nelson, D.L. y Cox, M.M, 2011. Lehninger: Principios de Bioquímica 4ta. Edición, Ed. Omega. p.p244 a 246.

Así que podemos decir que tiene 3 usos el DNS en estas reacciones: 1. Presentar una coloración que dependerá de la cantidad de glucosa que haya. 2. Permitir el equilibrio ceto-enolico de la fructosa. 3. Detener la reacción de la Invertasa con la sacarosa.

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