biomasa

Artículo de Biología Molecular N° 2. Presentado el 07 de septiembre de 2020 – GrupoL1B OBTENCIÓN DE BIOMASA. PRACTICA #

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Artículo de Biología Molecular N° 2. Presentado el 07 de septiembre de 2020 – GrupoL1B OBTENCIÓN DE BIOMASA. PRACTICA # 2 OBTAINING BIOMASS. PRACTICE # 2 Yovisna1 Caraballo1, Josias2 Cordero2, Nevis3 Correa3, Yesica4 Sanchez4 Email: [email protected] Universidad de Córdoba Facultad de Ciencias Básicas Biología Montería 2020 Presentado a: Álvaro José Lorduy Biólogo, M.Sc en Biotecnología. Universidad de Córdoba

RESUMEN En el contexto energético, la biomasa puede considerarse como la materia orgánica originada en un proceso biológico, espontaneo o provocado, utilizable como fuente de energía orgánica de las aguas residuales y los lodos de depuradora así como la fracción orgánica de los residuos sólidos. En la práctica de extracción de biomasa se tuvo como objetivo principal la obtención de la biomasa y extracción de ADN genómico y plasmidial, a partir de una muestra de E. Coli.

Palabras Clave: ADN, biomasa, genómico, plasmidial. ABSTRACT In the energy context, biomass can be considered as organic matter originated in a biological process, spontaneous or probocado, usable as a source of organic energy from wastewater and sewage sludge as well as the organic fraction of solid waste. In the practice of biomass extraction, the main objective was to obtain biomass and extraction of genomic and plamidial DNA from a sample of E. Coli. Keywords: ADN, Biomass, Genomic, Plasmidial.

1.

OBJETIVOS

Describir las pautas y recomendaciones generales para la obtención de biomasa y preparación para una posterior extracción del ADN genómico y plasmidial.

Artículo de Biología Molecular N° 2. Presentado el 07 de septiembre de 2020 – GrupoL1B

2.

INTRODUCCIÓN

La biomasa es el uso materia orgánica como fuente energía. Por su amplia definición. Se ve expresa por un amplio conjunto de materias orgánicas que se caracteriza por su heterogeneidad, tanto por su origen como por su naturaleza. La biomasa puede considerarse como la materia orgánica originada en un proceso biológico, espontáneo o provocado, utilizable como fuente de energía. Estos recursos biomásicos pueden agruparse de forma general en agrícolas y forestales. La transformación de biomasa en energía se puede llevar a cabo en procesos: extracción directa; métodos bioquímicos.

3.

MATERIALES Y MÉTODOS

Para este procedimiento se utilizaron los reactivos Cepa de escherichia coli y claro liria Bertani, para llevar a cabo con éxito el procedimiento se utilizaron los siguientes materiales: Centrifuga, micropipeta de 100-1000 ul, nevera, pipetas de 1 y 2 ml, pera automática, viales, tubos eppendorf, caja de Petri, guantes, tapabocas. Primeramente se preparó el caldo LB con antibióticos (ampicilina), luego se tomó con el asa una pequeña cantidad de colonias de E. Coli contenidas en la caja de Petri, y se suspendió el tubo de ensayo con caldo LB en presencia de un mechero de alcohol, se incubó el cultivo por 18-20 horas a 37 grados, después de alerce cumplido el tiempo se sacó el tubo y con la micropipeta automática se tomó 1,5 ml el cultivo E. Coli y se depositó al tubo eppendorf, posteriormente el tubo se tapó y se introdujo a la centrífuga con un tiempo de 3 minutos, al final del centrifugado se descartó el sobrenadante y se llenó nuevamente el tubo con 1,5ml del cultivo E. Coli y se volvió a introducir a la centrífuga repitiendo el procedimiento, posteriormente

la muestra se guardó al refrigerador a unos – 20 grados

4.

ANALISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La E. coli, que es una especie bacteriana de considerable importancia científica, económica y médica. Están incluidas en esta especie cepas no patógenas y otras que son capaces de causar enfermedades entéricas y diversos tipos de infecciones extraintestinales en humanos y animales (Johnson, 2002). Separándolo de su medio de cultivo a través de la centrifugación durante tres minutos a 12000 r.p.m. y descartando el sobrenadante. Se obtuvo una gran cantidad de biomasa, la cual sirvió para la posterior obtención de ADN genómico y plasmídico.

5.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

. 1) ¿Para qué se hace la obtención de biomasa de la bacteria E. coli antes de la extracción de ADN bacteriano? R//. Para realizar la extracción de ADN bacterianos, es necesario que el ADN se encuentre libre de enzimas, proteínas o agentes externos que puedan degradarlo o dañarlo, es por eso que se hace necesario realizar la obtención de biomasa ya que en la obtención de biomasa el resultado son organismos vivos y viables 2) ¿Porque se utiliza el caldo LB para hacer la inoculación del cultivo bacteriano de E. coli y no otro medio de cultivo? R//. El caldo LB contiene peptona de caseína y extracto de levadura que proporcionan al medio los nutrientes necesarios para el desarrollo óptimo de la mayoría de los

Artículo de Biología Molecular N° 2. Presentado el 07 de septiembre de 2020 – GrupoL1B microorganismos. El cloruro de sodio ayuda a mantener el equilibrio osmótico. Esto a su vez, le permite a la Bacteria E. coli, crecer y desarrollarse de manera favorable en este medio, por eso la utilidad del caldo.

6.

CONCLUSIONES

La realización de este estudio explica de manera detallada en que consiste la obtención de biomasa, la cual se describe como un proceso muy importante ya que principalmente lo que se hace es utilizar la materia orgánica y transformarla en una fuente de energía, además esta puede ser originada por un proceso biológico, espontáneo o provocado. El cultivo de E. coli que se encontraba en un sobrenadante de caldo nutritivo ayudó de manera satisfactoria a que se diera una buena obtención de biomasa ya que las condiciones y los componentes que esta poseía favorecía considerablemente al cultivo, alcanzando con éxito el objetivo planteado.

7.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Fusconi, R., Godinho, M. J. L., Bossola, N. R. S. (2005). Characterization and culture on sugarcane molasses of Gordonia Polyisoprenivorans CCT 7137, a new strain isolated from contaminated groundwater in Brazil.World Journal of Microbiology and Biotechnology, 21 (8-9), 1425- 1431 pathogenic Escherichia coli. In: Escherichia coli: Virulence mechanisms of a versatile pathogen. Donnenberg MS, Ed. Elsevier Science Inc. USA 2002a, 55-77. Peeters E, Nelis HJ, Coenye T. Comparisons of multiple methods for quantification of microbial biofilms grown in microtiter plates. J Microbial Methods 2008, 72: 157-165. ., Bhattacharyya, R., Wolfe, A.J. y Shiloach, J. (2005). Glucose metabolism at high density growth of E. coli B and E. coli K: Differences in metabolic pathways are responsible for efficient glucose utilization in E. coli B as determined by microarrays and Northern blot analyses. Biotechnology and Bioengineering 90- 805– 820.