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PRÁCTICA . ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE SUELOS Laura Isabel Ayerbe, Yaneth Carolina Aza Estacio, Hamilton Alexis Bernal Laboratorio de Microbiología - Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y de la Educación. Facultad de Ingeniería Civil, Universidad del Cauca GRUPO 1 1. RESUMEN

En esta práctica se realizó análisis a una muestra de suelo,dicha muestra fue tomada del parqueadero trasero de la universidad a la cual se le realizó diluciones seriadas 10-3 y 10-6 para hacer siembra por duplicado en diferentes tipos de agar los cuales fueron: agar nutritivo (AN), papa dextrosa agar (PDA), agar para fijadores biológicos de nitrógeno (FBN), agar para actinomycetes y agar para solubilizadores de fósforo (SRS), lo anterior con el fin de aislar y cultivar diferentes poblaciones de microorganismos presentes en una muestra de suelo, observar las diferentes colonias en las cajas de petri y proceder a su conteo.

Reacti vo

Dilució Fotografía caja de Petri n seriada

Núm ero de colo nias

10-5

7

10-6

5

10-5

436

10-6

63

Agar PDA

Agar FBN

2. OBJETIVOS ●

●

Conocer las técnicas básicas para realizar una toma de muestras de suelo para análisis microbiológico. aislar y cultivar poblaciones de microorganismos presentes en el suelo, realizando su recuento

3. RESULTADOS

Tabla 1 resultados experimentales para análisis microbiológico de una muestra de suelo

Agar SRS

Agar nutriti vo

Agar Actino micete s

Agar CRYM A

10-5

0

10-6

0

10-5

24

10-6

3

10-5

11

10-6

1

10-5

75

10-6

Para conocer la cantidad de suelo húmedo necesario para el análisis microbiológico se realizó el siguiente cálculo

16

cantidad de suelo húmedo =

𝑝ℎ 𝑝𝑠

* 10

cantidad de suelo húmedo =

50.3 42.1

* 10 cantidad de suelo húmedo = 11.95 g y para conocer el porcentaje de humedad del suelo % de humedad =

𝑃ℎ−𝑃𝑠 𝑃ℎ

% de humedad =

50.3493𝑔−42.1335 50.3493

Para los demás valores se realizó el mismo procedimiento, los resultados se muestran en la siguiente tabla Tabla 2. UFC/ mg de suelo experimentales

*100

reactivo

UFC/ mg de suelo

Agar PDA

2850

Agar FBN

53300

Agar SRS

0

Agar nutritivo

2700

Se calculó mediante las siguientes ecuaciones:

Agar Actinomicetes

1050

Recuento de colonias (RC) =

Agar CRYMA

0.0455

*100

% de humedad = 16.32 % Donde Ph= peso húmedo Ps= peso seco -

Conteo de microorganismos en las cajas de petri

𝑈𝐹𝐶∗𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑢𝑙𝑢𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑚𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS - Agar PDA =

RC 1

𝑈𝐹𝐶∗ 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖𝑜𝑛 = 𝑚𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

7𝑈𝐹𝐶∗10 5 =700UFC/mg 1000𝑚𝑔 RC2=

5𝑈𝐹𝐶∗10 6 1000𝑚𝑔

=5000UFC/mg

Rc PDAtotal=700+5000/2= 2850UFC/g suelo

El suelo no es solo el sustrato más utilizado en la producción agrícola, sino que además es un sustrato vivo y dinámico y representa uno de los ecosistemas más altamente biodiverso. Hasta 10.000 millones de células se pueden encontrar en un gramo de suelo, los microorganismos tales como bacterias, hongos y virus son los más abundantes y entre estos, ciertamente son muchos más los organismos benéficos que los patógenos. Los microorganismos del suelo son importantes ya que contribuyen al mantenimiento de la fertilidad química, física y biológica del suelo. Transforman nutrientes inorgánicos, que de otra forma no pueden ser absorbidos por la planta;

además favorecen la descomposición y mineralización de la materia orgánica. teniendo en cuenta los cultivos preparados y cultivados se noto que en en la mayoría hubo presencia de colonias de microorganismos, excepto para el agar SRS donde no se presentó colonias de microorganismos lo que nos infiere que en esa muestra de suelo no habi microorganismo solubilizadores de fósforo lo que quiere decir que en en el lugar de donde se tomó la muestra no hay microorganismos que pueden solubilizar el fósforo metálico para que la planta lo pueda absorber.El fósforo es un macroelemento esencial para el crecimiento de las plantas, participa en los procesos metabólicos, tales como la fotosíntesis, la transferencia de energía y la síntesis y degradación de los carbohidratos , esta falta de solubilizadores de fósforo puede ser generado ya que el el lugar de la toma de muestra es constantemente transitado y estropeado y se ve evidenciado ya que en ese sitio no hay presencia de vegetación variada y diversa. A partir de los resultados obtenidos también se observó que a mayor número de diluciones la cantidad de microorganismos disminuye lo cual esta evidenciado casi en todos los tipos de agar a excepción de agar SRS donde no se presentó crecimiento , también se evidencia que en la muestra de suelo tomada los microorganismos que están presentes son bacterias las cuales son propias de agar nutritivo, hongos y levaduras propios de agar PDA y microorganismos fijadores biológicos de nitrógeno, propios de agar FBN.

5. CONCLUSIONES

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●

●

●

Al tener un ecosistema suelo donde se pueden estudiar la diversidad de las poblaciones microbianas se hace importante para entender los efectos en la calidad del suelo, el grado de contaminación, cambios en la respuesta de las plantas a través del tiempo, etc. A partir de un correcto análisis microbiológico de suelos se puede determinar qué microorganismos están presentes en diferentes tipos de suelo y la importancia de estos se observa que a mayor número de diluciones seriadas se reduce la densidad de poblaciones de microorganismos presente en una muestra lo que facilita el conteo de colonias Se logró aislar y cultivar diferentes poblaciones de microorganismos en una muestra de suelo en la mayoría de tipos de agar a excepción de agar SRS evidenciado que en esta muestra no están presentes microorganismos solubilizadores de fósforo

6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ● ●

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http://www.amanitacesarea.com/g uia_ecologia3.html http://www.redagricola.com/pe/est udio-la-calidad-suelo-travesanalisis-microbiologicosbioquimicos/ https://books.google.com.co/books ?id=Uvg75tgmWoC&lpg=PP1&dq=micr oorganismos%20en%20el%20suel o&hl=es&pg=PP1#v=onepage&q= microorganismos%20en%20el%20 suelo&f=false https://www.smartfertilizer.com/es/articles/phosphoru s