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• Sergio Alvarez

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08/07/2010

CONTENIDO

Cultivos Auxiliares Profesor: Biólogo Víctor Vera

1.¿Porqué auxiliares? 2 Nutrición larval 2. 3. Técnicas de cultivo 4. Conclusiones

Universidad Nacional del Callao Facultad de Ingeniería Pesquera y de Alimentos Departamento Académico de Ingeniería Pesquera Asignatura: MARICULTURA Semestre Académico: 2010 A

1. ¿POR Q QUÉ CULTIVOS AUXILIARES? ECLOSERÍA DE PECES MARINOS

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PROTOCOLO DE ALIMENTACIÓN (Peces marinos)

ECLOSERÍA DE PENEIDOS Alimento Balanceado

Artemia Congelada Artemia Nauplios + Metanauplios Enriquecimiento (DHA - EPA) Rotiferos

Brachionus plicatilis, B. rotundiformis Enriquecimiento (DHA - EPA)

Larvas Trocóforas

A. purpuratus

Microalgas (Tetraselmis tetratele, Nannochloris sp., Isochrysis galbana)

0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 33 36 39 42 45 48 51 54 57 60 DÍAS DE ALIMENTACIÓN

PROTOCOLO DE ALIMENTACIÓN (Crustaceos)

ECLOSERÍA DE MOLUSCOS

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larvi 2005

4th fish & shellfish larviculture symposium ghent university, belgium september 5 - 8, 2005

PROTOCOLO DE ALIMENTACIÓN L MEN N (Bivalvos)

Table II. Installed infrastructure, current and future market of Peruvian hatcheries per specie Actual level per Projected Annual Cost batch of seeds demand of Number of demand of seeds Species production of seeds seeds to 2015 hatcheries (US$x103) (x106) (x106) (x106) L.vannamei 1 50 2.2 720-1200 9 600- 10 800 M. rosenbergii 5 0.5-0.7 20 1 10 A. purpuratus 4 8 5-10 120 1200 P. brachypomus 7 0.5 70-100 4 8 C. 7 0.5 70-100 4 8 macropomum V. Vera, J. Bautista, M. Quispe, R. Vicencio and G. Alvarez. 2005. Current Status of Larviculture in Peru. Larvi 2005-Fish & Shellfish Larviculture Symposium, p. 546-549.

2. NUTRICIÓN LARVAL

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ALIMENTACIÓN EXÓGENA

ALIMENTACIÓN EXÓGENA 2.1 Tamaño adecuado de la presa • Microalgas [2 – 30 µm] • Rotíferos [100 – 340 µm] • Artemia [396 – 515 µm]

Falta de alimento

Nivel molecular

Nivell Ni tejido

Nivel morfológico

2.2 Composición nutricional • Proteínas • Lípidos

2.3 Atractabilidad

Cascada de acontecimientos

• Estímulo químico (aa libres: prolina, alanina, metionina) • Movimiento

2.1 Tamaño adecuado d d d de lla presa

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460.0

450.0

Longitud del nauplio de 9 poblaciones de Artemia del Perú (µm)

2.2 Composición nutricional

440.0

430.0

420.0

410.0

400.0

390.0

380.0

370.0

360.0 COL

VIRR

GUAD

MB

CHIM

VENT

HIP

MIL

AREQ

5

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Changes in DHA/EPA ratio of rotifers in different algal media

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TIPO DE ACIDOS GRASOS PRESENTES EN ROTIFEROS PRODUCIDOS EN VARIOS SUSTRATOS

ACIDOS GRASOS CULTIVO

ROTIFERO LEVADURA (S. cereviceae)

ROTIFERO LEVADURA (1) Chlorella marina

ROTIFERO Chlorella marina

ROTIFERO AGUA DULCE

16:0

8.7

11.7

16.8

8.9

16:1ω7

24.2

16.6

24.3

18.9

18:0

4.8

6.0

1.7

1.6

18:1ω9

33.9

22.8

18:2ω6 (*)

5.8 (*)

10.4 (*)

3.2 (*)

15.7 (*)

18:3ω3 (*)

0.6 (*)

2.2 (*)

0.4 (*)

10.1

10.2 (*)

9.0

20:1

6.0 (*)

3.3

2.4 (*)

0.3

20:3ω3

0.4

2.3

4.4

0.8

20:4ω6

0.4

2.3

4.4

0.8

20:4ω3

0.5

0.6

0.2

1.1

20:5ω3 (‡)

1.0 (‡)

8.1 (‡)

24.1 (‡)

1.9 (‡)

22:1

1.7

1.5

1.3

-

22:5ω3

0.2

1.7

3.8

0.3

22:6ω3 (‡)

0.5 (‡)

0.9 (‡)

0.5 (‡)

- (‡)

εω3HUFA (‡)

2.2 (‡)

11.3 (‡)

28.6 (‡)

- (‡)

(1) Watanabe et al., 1983 (*) Acido graso esencial para especies marinas (‡) Acido graso esencial para especies de agua dulce http://www.fao.org/docrep/field/003/ab473s/AB473S03.htm#chIII

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Intra-strain variability of 20:5n-3 (EPA) content in Artemia. Values represent the range (area percent) and coefficient of variation of data as compiled by Léger et al. (1986). Cyst source

20:5n-3 range (area %)

Coefficient of variation (%)

San Francisco Bay, CAUSA

0.3-13.3

78.6

Great Salt Lake (South arm), UT-USA

2.7-3.6

11.8

Great Salt Lake (North arm), UT-USA

0.3-0.4

21.2

Chaplin Lake, Canada

5.2-9.5

18.3

Macau, Brazil

3.5-10.6

43.2

Bohai Bay, PR China

1.3-15.4

50.5

HUFA levels in 24-h Super Selco®-enriched Artemia metanauplii g storage g during at 10 and 25°C

2.3 Atractabilidad

3. TÉCNICAS DE CULTIVO

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3.1 CRITERIOS DE SELECCIÓN Microalgas

• Tamaño celular apropiado • Valor nutricional de la especie • Potencial de cultivo masivo • Facilidad de manejo • Digestibilidad celular

Rotíferos

• Tamaño T ñ • Crecimiento poblacional • Resistencia al estrés

Artemias

• Tamaño • Valor nutricional • Eclosionabilidad

3.2 MICROALGAS Más de 40 especies, aisladas en diferentes partes del mundo y cultivadas como cepas puras:

Chlorella spp. pp Thalassiosira pseudonana Chaetoceros gracilis Isochrysis spp var. tahitiana Nannochloris atomus

Skeletonema m costatum m Chaetoceros calcitrans Isochrysis galbana Monochrysis luthery Nannochloropsis oculata

Aislamiento y mantenimiento de cepas axénicas

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SALA DE MICROALGAS

La sala de cultivo de microalgas produce un promedio de 80 a 220L día-1, distribuidos entre 4 a 12 bombonas de 20L c/u respectivamente. Según los requerimientos los cultivos se masifican a 700L semanales, distribuidos en 2 tanques de 300L (2003)

Algal production cost as a function of the production capacity for 8 bivalve hatcheries. Filled and unfilled symbols represent data obtained from academic and commercial hatcheries, respectively. The dotted line connects the estimates from one company

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3.3 ROTIFEROS

Cultivo en mangas

Anatomía de Brachionus plicatilis (Rotífera) en: B. Pejler et al., 1983).

CICLO DE VIDA

hembra amíctica

PARTENOGENESIS Diploide ameiotico (2n)

estímulo eclosión

huevo amíctico

Mixis Induction Protein

estímulo mixis quiste (2n)

hembra míctica (2n)

SEXUAL fertilización

Mate Reconigtion Protein

mitosis

meiosis

esperma (n) macho (n)

sin fertilización

huevo Mictico (n)

http://www.fao.org/docrep/field/003/ab473s/AB473S03.htm#chIII

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Caracterización Morfológica

Sapelo (USA) L1

98

Caracterización Molecular

N Iberia

Elait (Israel)

S Iberia Grand Cayman Cepa Agraria

B. plicatilis s.s.

93

Canada China, Japan Atlit (Israel)

Australia

L

B. lineage ‘Nevada’ B. lineage ‘Austria’ B lineage B. li ‘Manjavacas’ ‘M j ’

SS

S

B. lineage ‘Lost Lake’ 99 SS2

B. rotundiformis B. lineages ‘Australian I, II, III’ B. lineage ‘Cayman’ B. lineage ‘Tiscar’ 6

99 Puerto Viejo (Perú) Chilca (Perú)

81

37

Ventanilla (Perú)

99

B. ibericus B. lineage ‘Almenara’

B. calyciflorus Bc6ALM2 B. calyciflorusB.1 quadridentatus Bq4PET21 B. quadridentatus Bq4SAL7 99

Outgroups

http://www.iztacala.unam.mx/rotiferaXI/Abstra cts_ROTIFERA_XI.pdf

2% sequence divergence

CEPARIO

Romero, L., Vera, V. and Gomez, A. 2006. Characterization of Peruvian strains of eurihaline Brachionus species used in aquaculture. p 75.

CEPARIO PREPARACION DE AGUA DE MAR ARTIFICIAL Salinidad: 35 y 12 g . L-1 Sal marina artificial de la Marca MARINEX diluida en agua filtrada por osmosis inversa y esterilizada por luz ultravioleta, y ozonizada

SEMBRADO DE MICROALGAS Cepa: Nannochloris maculata Condiciones de cultivo: 35 g . L-1, 20ºC, 3000 Lux Medio de cultivo: F/2 modificado de Guillard

PREPARACION DEL CONCENTRADO DE MICROALGAS Concentracion por centrifugación a 3700 rpm por 20 min Almacenamiento en oscuridad a 4 ºC Concentracion promedio obtenida: 10 . 108 cell . mL-1

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CEPARIO PREPARACION DEL MEDIO DE CULTIVO Conteo y calculo del concentrado de microalgas Dilucion a 10-20 x 106 cell . mL-1

SEMBRADO DE ROTIFEROS Densidad inicial: 2 rot . mL-1 Densidad microalgal: 15 x 106 cell . mL-1 Temperatura: 25 ºC Salinidad: 12 y 35 g . L-1 Iluminacion: 2500 lux

MONITOREO Observacion del estado de condicion del cultivo de rotiferos: • número de huevos por hembra • presencia/ausencia de machos • actividad MOTILITY

PROTOCOLO DE CULTIVO PARÁMETROS DE CULTIVO

• Temperatura: 25º C • Luz: 2000 lux (01 fluorescente), 24 horas luz (artif - natural)) • Aireación : Moderada (60 -100 litros de aire/ minuto/ m³) • Salinidad: 25%0 • pH: 7.5 – 8.5 • Oxígeno : > 2 ppm • Amonio: < 1mg/l

PROTOCOLO DE CULTIVO • Número de Hembras con presencia de Huevos

(huevos totales) debe mantenerse en un 20 -30 % de la población. • Observación de Color y Olor: Estos factores indican presencia de agentes contaminantes. El cultivo debe presentar un color claro (ligeramente blanco) y sin presencia de olores extraños. • Movilidad: El rotífero debe ser dinámico, con desplazamiento rápido. Un desplazamiento lento indica presencia de contaminación y/o manifestación de alguna enfermedad.

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Sistema SemiSemi-continuo

• En este sistema las siembras se realizan con un intervalo de 08 días, efectuándose a partir del quinto día 04 cosechas sucesivas diarias.

• Los volúmenes de siembra y cosecha están establecidos en 150 y •

350 litros respectivamente. La reinoculación o resiembra se efectúa con un volumen de rotíferos procedentes de la última cosecha sucesiva inmediata, el cual es destinado a un nuevo tanque programado.

• Sistema Batch

• En este sistema las siembras y cosechas se efectúan en forma

•

peródica cumpliendo un período de cultivo total de 05 días, al término del cual se cosecha todo el cultivo y parte de ello es destinado a la reinoculación del próximo tanque previamente programado. Los volúmenes de siembra y cosecha están establecidos en 150 y 350 litros respectivamente.

Estimuladores de crecimiento y Nutrición Lecitina de Soya: • Se emplea para levantar y acelerar el cultivo, se debe agregar una cápsula (1200 mg) por cada tanque de 350 litros. g : Microalgas • Se emplea 30 ml/ litro/ día hasta el final de la cosecha o sólo en su etapa inicial o arranque (16 litros por tanque de 350 litros).

Dosificación

• Levadura : • Microalga :

1g/millón de rotíferos 30 ml/ litro (Isochrysis ,

Raciones • Levadura : • Microalga :

04 raciones/ día 01 ración/ día

Nannochloris)

Densidades de siembra y cosecha Producción

Siembra

Cosecha

Bajas Medias Altas

100 rot / ml 200 rot / ml 300 - 400 rot / ml

150 - 200 rot / ml 500 - 600 rot / ml 1000 rot / ml

Vitamina BB-12 : • Se adiciona al tanque a razón de 1.4 µg / ml o también según criterio. Con esto presentan un 70% de incremento en la tasa reproductiva.

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Tiempo de los cultivos

RECOMENDACIONES

• El tiempo de los cultivos es variable y depende mucho de las condiciones del medio y del manejo propio.

• Se debe renovar la cepa de rotíferos por cada campaña (anualmente)

• El tiempo promedio estimado para un cultivo (350 litros) es de 05 días para un sistema batch y de 8 8--9 días para un sistema semi semi--continuo. continuo

• Cultivos a altas densidades tienen un tiempo de duración corta, respecto a los cultivos a bajas densidades.

• Al momento extraer la cepa, se debe seleccionar el

tanque de cultivo que se encuentre en excelentes condiciones (fase exponencial) • El manejo j del d l cultivo lti debe d b ser realizado li d por una sola l persona con dedicación exclusiva, ya que otros manejos o criterios podrían alterar la producción. • El adicionar poquísima o nula aireación al tanque, produce proliferación de fouling. fouling.

• Cultivos alimentados con microalgas tienen un tiempo de duración mayor respecto a los cultivos alimentados con levadura.

Fatty acid concentration in enriched rotifers (in mg.g-1 DW) Type of enrichment

EPA

DHA

CS

5.4

4.4

0.8

15.6

Nannochloropsis sp.

7.3

2.2

0.3

11.4

DHA-Super Selco

DHA/EPA (n-3) HUFA

41.4

68.0

1.6

116.8

40.6*

73.0*

1.8*

123.1*

43.1**

46.0**

1.1**

95.0**

* Concentration after 7 h storage at 20°C ** Concentration after 12 h storage at 20°C

Los rotíferos no degradan los ácidos grasos con que son enriquecidos

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Hikari Rotifers Frozen Food * Packed in pure water and available in "no touch" cube packs,

4 Artemia: Caracterización Biológica y Usos en Acuicultura

* Bio-Pure frozen foods provide maximum nutrition with minimum mess for you at feeding time.

4, 29 USD / 50 g 81 000 – 417 000 rot. 52, 9 – 10, 3 USD / 106 rot.

http://www.drsfostersmith.com/product/prod_display.cf m?c=3578+7927+13927&pcatid=13927

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CICLO DE VIDA

ECLOSIÓN DE QUISTES DECAPSULADOS DE ARTEMIA EN HATCHERY DE LANGOSTINOS

TANQUE DE 5 M3

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Uso de biomasa enriquecida en el sector de maduración de peneidos

ESQUEMA DE BIOENCAPSULACION (Sorgeloos, P. and P. Léger, 1992)

Colesterol

Fosfolípidos

Comprende hasta un 22 % de los lípidos totales en el ovario de crustáceos. Precursor en las síntesis de hormonas esteroideas. Calamar, bivalvos.

Mejora la producción de p , la eclosión y la nauplios, espermatogénesis. Su deficiencia produce retardo en la maduración. Lecitina de soya.

Triacilgliceridos Fuente de energía en huevos y nauplios para afrontar la embriogénesis, la eclosión y el desarrollo naupliar. Se incrementa de 8,3 % a 33, 8 % en ovarios. Aceites de origen marino

GLS

DATOS DE PRODUCCION

TE (%) 90 80 70 60 50

n/g

BSF TE (%)

240,000 216,000 80 190,000 165,000 140,000

CHINA

n/g

TE (%)

n/g

280,000

80 70 60 50

190,000 165,000 145,000 120,000

RUSIA TE (%)

n/g

CIS -INVE TE (%)

n/g PREMIUM A B C

BIOMASA

QUISTES

Salgado

1 000 Kg./Ha/mes

24 Kg/Ha/año

Acarau-Brasil

450-600 Kg./Ha/mes

7.5-15 Kg./Ha/mes

MARPESA

2 000 Kg./mes

6 Kg./Ha/mes

440 micras

425 micras

+ 440 micras

+ 440 micras

+ 490 micras

YOCKTER S.A.

1 300 Kg./Ha/mes

S.I.

270,000 q / g

350,000 q / g

237,000 q / g

200,000 q / g

260,000 q / g

Vietnam

S.I.

1 000 Kg./año

1 Caja / 12 libras

1 Caja / 12 libras

20 Cajas / 12 libras

20 Cajas / 12 libras

Slow DHA metabolism after enrichment

FUENTE/ORIGEN

70 60 50 40

140,000 120,000 100,000 80 000 80,000

75 70

18

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Biomasa Artemia

Kg. (US Dollar)

Kg. caja

Caja (US Dollar)

No Enriquecida

5.50

50

264.00

Enriquecida OMEGA

9.00

50

432.00

500 kg. Mínimo (10 cajas)

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